11细胞衰老和凋亡技术分析.pptVIP

组蛋白去乙酰酶 (HDACs) 在衰老中的作用 HDAC活性水平提高与细胞衰老有关，当我们过表达一种p300变异蛋白，或加入一种特殊的p300 化学抑制因子时，发现正常人类细胞出现不可逆转的生长停滞和衰老。 DNA 甲基化 DNA甲基化序列丢失水平可作为一种检测细胞代数的方法。 正常细胞在培养几代后不断出现基因组DNA 5-甲基胞嘧啶的丢失。CpG岛甲基化程度在生物衰老过程中降低。同时，在不老的细胞系中DNA甲基化维持稳定的水平。 染色质重塑和衰老 在 p53, Rb, 和 ING (生长抑制因子) 信号通路中的基因可通过使染色质重塑影响细胞衰老状态和调控基因表达。 p16INK4a 与染色质重塑复合物 hSNF5亚单位结合诱导恶性肿瘤细胞衰老。 PASG是 SNF2 家族成员, 是维持正常DNA甲基化水平和基因表达模式的关键组分。抑制PASG导致衰老相关的肿瘤抑制基因表达上升，衰老相关的半乳糖苷酶增加，且出现衰老表型。 RNA 降解和衰老 2. 凋亡 凋亡和坏死 外源性死亡信号通路 内源性死亡信号通路 DNA 损伤引起的凋亡 在凋亡Caspases 信号通路中线粒体的重要作用 凋亡的抑制因子 凋亡之外的细胞死亡类型 2002年度诺贝尔生理学或医学奖授予了： 布伦纳（S.?Brenner） 苏尔斯顿（J.?E.?Sulston） 霍维茨（H.?R.?Horvitz）， 他们在发育和程序性细胞死亡方面 做出了开创性的工作（奖金一百万美 金）。 发育过程中伴随器官形成出现细胞凋亡  不同类型的凋亡细胞核型 a) 对照组染色质 b,d,g-i) Caspase非依赖性凋亡样的改变 c,e) 典型凋亡 f ) Caspase依赖性凋亡样的改变 凋亡和坏死 凋亡有关基因表达激活 蛋白合成活跃 蛋白酶活化 代谢/合成 改变 渗漏 — 线粒体变化 — 细胞表面形成突起 细胞膜上的磷脂酰丝氨酸分解 细胞膜变化 — 染色质固缩，断裂为大小不等的片段 核变化 细胞器发生渗漏 细胞膜皱缩，反折 第一个细胞外观上的变化 缺氧症 身体损伤 化学损伤 缺少生长因子 激素影响 轻微毒害 原因 坏死 凋亡 凋亡与健康和疾病相关 凋亡是一种系统的可遗传的程序性行为。 细胞凋亡参与细胞分化和组织恒定 。 凋亡直接参与退行性疾病（例如Alzheimer, Parkinson ），自体免疫疾病 (例如 Rheumatoid Arthritis), 滤过性毒菌引起的疾病 的形成 致病 (例如 AIDS) 和致瘤作用 (癌症发生). 细胞凋亡的发生过程可分为三个阶段 第一阶段 ?细胞死亡受体激活 ? 颗粒蛋白酶B进入细胞 ? 线粒体功能紊乱 第二阶段 ? 细胞中caspases通路激活 第三阶段 ? 凋亡小体形成 外源性死亡通路 死亡受体: ● CD95 (或者Fas), ● TNFR1 (TNF receptor-1) ● DR4 和 DR5. ● 预凋亡配体, ● 受体，如与TNF同源的膜受体，可识别和结合凋 亡配体 ● 编辑蛋白,致瘤因子受体 (TNFR)1相关的死亡结构 域(TRADD) 对募集信号分子结合到膜上的TNFRI 受体复合物上起重要作用。 ● 编辑蛋白结合在受体的胞质面，募集信号分子 外源性凋亡信号转导通路的主要组分 ● 执行caspases完成细胞凋亡过程。这些受体的 胞内结构域有一段80个氨基酸的伸展肽链，我们 称之为死亡结构域。在死亡结构域形成一个接 头蛋白Fas相关蛋白与之结合(FADD)的死亡诱 导信号复合体 (DISC) ，且前体caspase 8 变成 有活性的caspase 8 。 ● 然后，有活性的 caspase 8激活执行caspases 的下游分子。 受体 配体 CD95 (Fas) CD95L(FasL) TRAIL-R1-4 TRAIL[APO-2L] TNFR1(CD120a) TNFα，TNFβ(LTα) OPG