酵母表面展示技术资料祥解.pptVIP

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  • 2016-04-27 发布于湖北
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细胞表面是细胞内外的功能界面。一些表面蛋白横穿过质膜,另一些以共价或非共价结构与细胞表面复合物结合一起。细胞能够锚定特定的表面蛋白,并且能将其限制在细胞表面的特定区域。在生物技术中,细胞表面通常用于研究蛋白跨膜的机理。酵母细胞表面展示技术是近年来发展较快的一种真核蛋白表达系统,其基本原理是将外源靶蛋白基因(外源蛋白)与特定的载体基因序列融合后导入酵母细胞,利用酵母细胞内蛋白转运到膜表面的机制使靶蛋白固定化表达在酵母细胞表面,在医药、食品、生物燃料等多个工业领域都有广泛的应用前景。 酵母是单细胞真核生物,根据交配型的差异分为两种单倍体:MATα和MATa,其细胞表面分别表达α-凝集素和a-凝集素,它们可以介导细胞之间的交配融合。酵母表面展示系统应用的是酿酒酵母的a-凝集素,外源蛋白借助它在细胞表面得到展示。a-凝集素由核心亚单位(Aga1)和结合亚单位(Aga2)两部分组成,Aga1共有725个氨基酸,它与酵母细胞壁的β-葡聚糖共价连接。Aga2共有69个氨基酸,它通过两个二硫键与Aga1结合,表达于酵母细胞表面。Aga2的N端部分参与二硫键的形成,外源蛋白通过与Aga2的C端融合可展示于酵母细胞表面。 宿主细胞 酿酒酵母一直被认为是安全的模式生物(GRAS)而广泛应用于食品工业和医药工业,也是目前常见的用于酵母表面展示的宿主细胞。除酿酒酵母外,近年来酵母展示平台已被拓展至某

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