细胞工程考试解析.docVIP

1 细胞全能性：营养生长中心 形成层 薄壁细胞 厚壁细胞 特化细胞； 受精卵 生殖细胞 体细胞 2 培养基一般由无机营养、碳源、维生素、植物生长物质、有机附加物等五类物质组成。 3 快繁技术分为4个阶段：无菌培养物的建立，培养物的增殖，诱导生根，试管苗的移栽。 4 根据外植体的不同，植物组织培养可以分为几种？比较常用的是哪些？ 植物组织培养可以分成植株培养、胚胎培养、器官培养、组织培养、细胞培养、原生 质体培养六大类。 5 植物组织培养有哪些特点？ 植物组织培养具有经济高效，管理方便，利于自动化，技术含量高，实验误差小，人 工控制能力强，生长周期短，生长速度快，实验重复性好等特点。 6 植物组织培养基的基本类型及其组成： ①MS、MT、White、Nirsch、Blaydes、N6、B5、NT ②大量元素、微量元素、维生素、氨基酸、糖和水 7 组织培养中，pH有什么作用？如果pH过高或过低会有什么后果？ ①由于PH值直接影响培养材料对营养的吸收，因此影响到新稍的生长、繁殖。植物在 自养条件下是可以自行调节体内酸碱度的，但在立体条件下，则失去自行调节能力，因此 配置培养基时，调节培养基PH值是必要的。②不同植物对培养基PH值的要求是不一样 的，大多在5.0—6.5，PH值适度因材料不同而异。PH过高时，培养基会变硬；PH过低 时，则影响培养基的凝固。 8 实验人员进入接种室接种之前,应做哪些准备工作? 进入接种室前，操作人员应先用肥皂水洗净双手，操作前再用70%酒精擦洗双手。接种 服、帽子、口罩等要经常清洗，保持干净，并利用高温湿热灭菌方法，定期灭菌。也可以 紫外线照射灭菌。操作时操作人员应穿好工作服，带好工作帽，把接种器械沾以70%酒精 灼烧灭菌，灭菌过的器械接种前严禁再度感染，并要特别注意防止“交叉传染”造成的污染。 9 在接种过程中,通过哪些措施来防止细菌对接种工具、接种材料的污染? 首先接种前一定要用消毒水擦拭，70%~75%酒精进行喷洒杀菌降尘，不管是开母苗之 前还是接种过程或是开关子瓶培养基，都应该在酒精灯上操作。操作过程中所有的动作都 应尽量的小幅度，特别是不能横扫所有灭过菌的东西；接苗是手指不能接触到瓶口，如果 镊子不小心碰到瓶口或台面那就不要犹豫，直接换掉；分切的整个过程动作要快，时间越 长越容易污染。每份切完一瓶都要进行台面的清洁及消毒。 10 对外植体表面消毒时为什么常用〃两次消毒法″? 使用消毒剂的原则是既要达到消毒目的，又不能损伤植物组织和细胞，还要符合就 地取材的原则。对一些容易污染、较难灭菌的外植体进行表面消毒时，用单一消毒剂不 能收到好的效果，所以常选用两种消毒剂交替浸泡法。一般，首先用75％乙醇浸泡外植 体数秒钟至30s，然后置于0.1％氯化汞溶液5～10min或含有2％活性氧的次氯酸钠溶 液5～30min，然后用无菌水洗涤。 11 外植体用消毒剂消毒后,为什么要用无菌水漂洗 ?为什么常在消毒溶液中加入l-2滴表 面活性剂(如 吐温)? ①消毒水都具有很强的烧蚀性，在杀灭细菌的同时，也会作用于正常的细胞组织，影 响正常细胞的成长或再生，所以外植体消毒后一般要用无菌水漂洗，以清除残留的具有 杀伤力的消毒剂。②消毒液的作用是杀菌，但是有可能所要杀菌的物体表面存在一些油 脂污物，这些油脂覆盖着细菌，起到了一定的保护作用。而细菌本身也是有机物，有一 定拒水性，消毒液不容易深入到菌团内部去。消毒液中加入表面活性剂的目的主要是将 消毒液渗透、扩撒到菌团内部，充分发挥消毒液的作用。 12 什么是细胞株？什么是细胞系？两者相同吗？ ①细胞系：指从原代培养物经传代培养后得来的一群不均一的细胞，是由原先存在于 原代培养物的各种细胞类型所组成的。②细胞株：通过选择或克隆化培养，从原代培养 物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的细胞群。③区别:a它们都是传代培养里面的 概念. 都是10代以后的b细胞株是传代培养里10~50细胞株细胞系c对于细胞繁殖而 言,传到10代就很不容易了,所以细胞株是极少数的细胞d 50代以后,细胞繁殖会出现另 一个危机,基本上没有什么细胞能再传下去了.但是,有细胞发生了基因突变,像一个癌细 胞一样无限地分裂下去,这就是细胞系. 13 简述动物细胞传代培养的操作程序及注意事项？ ①在传代培养前，首先将培养瓶置倒置显微镜下，观察细胞是否已长成致密单层，如 已长成单层，则可进行细胞的传代培养。②为了维持细胞系的正常生