湖科大分子生物学总复习(完美版)2014讲义.docVIP

第一章 绪论 1、分子生物学研究内容有哪些方面？ 答：结构分子生物学，基因表达的调节与控制，DNA重组技术及其应用， 结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome DNA的二级结构Watson-Crick双螺旋特点 DNA两条多核苷酸链反向平行盘绕而成的双螺旋结构： 为右手双螺旋，两条链以反平行方式排列； 两条由磷酸和脱氧核糖形成的主链骨架位于螺旋外侧，碱基位于内侧； 两条链间存在碱基互补，通过氢键连系，且A=T、G ≡ C（碱基互补原则）； 碱基平面与螺旋纵轴接近垂直，糖环平面接近平行 螺旋的螺距为3.4nm，直径为2nm，相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm，每圈螺旋包含10个碱基对 螺旋结构中，围绕中心轴形成两个螺旋形的凹槽。（即有大小沟）） DNA变性和复性Tm、 退火DNA变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程； 复性：变性DNA在适当条件下，分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象； Tm(熔链温度)：DNA加热变性时，紫外吸收达到最大值的一半时的温度，即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度） 退火：热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，称为退火 真核生物基因组结构特点 真核基因组结构庞大 哺乳类生物大于2X109bp 单顺反子 单顺反子：一个基因单独转录，一个基因一条mRNA，翻译成一条多肽链； 基因不连续性 断裂基因（interrupted gene）、内含子(intron)、 外显子(exon) 非编码区较多 多于编码序列(9:1) 含有大量重复序列 假基因概念 基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。 C值矛盾或C值悖论 C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致，称为C值矛盾或C值悖论 真核生物染色体的组成 DNA Histone(组蛋白：染色体上的结构蛋白，包括H1、 H2A、H2B、H3、H4）特点 极端保守性 无组织特异性 鸟类、鱼类、两栖类红细胞中无H1，而有H5；精细胞的组蛋白为鱼精蛋白。 氨基酸分布的不对称性:N端碱性aa 可修饰作用:甲基化、乙酰化、磷酸化、糖基化 富含Lys的H5 核小体组成染色体的基本结构单位，由组蛋白和200bp DNA组成的直径约10nm的球形小体 转座转座子转座的机制 第三章 DNA Replication and repair DNA复制的主要特征 半保留复制概念 DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全从新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制 复制子DNA 复制的几种方式 分为线性DNA双链的复制、环状DNA双链的复制 前导链(leading strand)滞后链(lagging strand)冈崎片段(Okazaki fragment)前导链：以复制叉移动的方向为标准，一条模板链的走向是3’→5’， 子代链复制时以5’→3’方向连续合成，这一条链称为前导链 滞后链：另一条模板链的走向是5’→3’， 子代链通过不连续的5ˊ-3ˊ聚合而成，称为滞后链 冈崎片段：滞后链的合成是一段一段的。DNA复制时，由滞后链所形成的子代DNA短链称为冈崎片段（是在DNA半不连续复制中产生的长度为1000-2000个碱基的短的DNA片段，能被连接形成一条完整的DNA链。） DNA polymerases in E. coli 及其主要功能DNA结合蛋白(single stranded DNA binding protein, SSB) 在复制中维持模板处于单链状态并保护单链的完整。 常见的真核细胞DNA聚合酶及主要功能 DNA-pol α 起始引发，有引物酶活性。 DNA-pol β 高保真修复酶，碱基切除修复。 DNA-pol γ 在线粒体DNA复制中起催化作用。 DNA-pol δ 延长子链的主要酶，有解螺旋酶活性。 DNA-pol ?ε 参与合成后随链，在复制过程中起校读、修复和填补缺口的作用。 拓扑异构酶作用机制 DNA复制过程 DNA双螺旋的解旋 在DNA 复制过程中，后随链是怎样合成的 E.coli 中，DNA聚合酶Ⅰ具有3’→5’外切酶活性，被用来去除引物； DNA连接酶连接相邻的冈崎片段使之成为一条完整的子代链。 与原核生物相比真核生物DNA复制的特点 端粒 (telomere)逆转录概念 几种修复机制模板链：DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链； 编码链：DNA双链中与模板链相