第九章微生物的生态与环境保护课件.pptVIP

前言 第一节 微生物在自然界中的分布 第二节 微生物与环境间的关系 第三节 微生物与自然物质循环 第四节 微生物与环境保护 几个概念 生物圈：地球上的所有生物。 生态系统：生物群落与其无机环境相结合、相作用、相调控而成的动态系统。 群落：同一环境中两个以上种群由于生活繁殖上的连锁而构成相依赖、相制约的生物集团。 种群：生活在同一环境中的同种个体组成的能繁殖集团。与同种别地的种群有隔离、有界限。 1、取土样 选定取样点，按对角交叉（五点法）取样。先除去表层约2cm的土壤，将铲子插入土中数次，然后取2-10cm处的土壤。盛土的容器应是无菌的。将5点样品约1kg充分混匀，除去碎石、植物残根等。土样取回后应尽快投入实验，同时取10-15g，称重后经105℃烘干8h，置于干燥器中冷却后再次称重，计算含水量。 2、倒平板 熔化已灭菌的四种培养基(细菌、霉菌、酵母菌、放线菌四大类 )并冷却至45℃左右倒平板，凝固待用，每种培养基每个稀释度各三只平板。 6、混菌法接种 细菌分离分别精确吸取10-7，10-6，10-5三个稀释度的菌液1mL；放线菌分离分别吸取10-5，10-4，10-3三个稀释度的菌液1mL；霉菌分离分别吸取10-4，10-3，10-2三个稀释度的菌液1mL；酵母菌分离分别吸取10-6，10-5，10-4三个稀释度的菌液1mL，对号加在已凝固的平板上，同时做空白对照，空白对照只加培养基，不接种菌液。 7. 培养 将涂布后的平板上倒置于恒温箱中，细菌在37℃下培养24-48h，霉菌在28℃下培养3-5d，放线菌在28℃下培养5-7d，酵母菌30℃下培养2-3d,观察结果。 清水型水生微生物 ●洁净湖泊和水库，微生物数量少（10-103/ml），以化能自养型和光能自养型微生物为主，部分腐生细菌，如色杆菌和微球菌等；霉菌中如水霉、绵霉等的一些种；以及单细胞和丝状藻类、原生动物，数量较少。 ●根据微生物对水生环境中的营养要求，将其分为三类：贫营养细菌（1-15mgC/L）、兼性贫营养细菌（指一些在富营养培养基中经反复培养后也能适应并生长的贫营养细菌）、富营养细菌（10gC/L） ●贫营养指数（O.I）：某水样中贫营养细菌占总菌数的百分比 腐败型水生微生物 环境：大量的人畜排泄物、生活污物和工业废水等，有 机物含量大增 微生物数量和类群： 数量：大量外来的腐生细菌，使腐败型水生微生物尤其是细菌和原生动物大量繁殖，每毫升达到107-108个。 类群：G-无芽孢杆菌，如E. coli, Bacillus、Vibrio和Spirillum等的一些种,纤毛虫类、鞭毛虫类和根足虫类等原生动物,动植物致病菌。 繁殖及后果：因水环境中的营养等条件不能满足其生长繁殖的要求，加上周围其它微生物的竞争和拮抗关系，一般难以长期生存，但水体的流动，会造成病原菌的传播。 采取土壤样品要考虑的几个问题 土质肥，微生物含量高，特别肥沃的土壤中细菌多，放线菌少；在植物残体枯枝落叶下的土壤中较多含有拮抗性真菌。 离地面5－20cm处的土壤通气良好、不受阳光直射，喊菌量最高。 采土季节以春秋两季最好。 采土方法：选择适当地点、铲除表土、取土样数十克，盛入事先准备的无菌防水纸袋中，其上记录采土时间、地点、植被情况等。 多点采土、混合分离，可以代表每一地块上的微生物分布平均情况。 土样的富集培养 含有目的菌较多的土样不需要富集培养 如果原有样品中目的菌含量低，可以人为地添加相应的基质，培养使之以较其它微生物更快的速度生长繁殖，从而提高它们在样品中的比例，便于分离。 富集培养的一般方法：采用有利于目的菌种而不利于无关微生物的营养和培养条件，以达到使目的菌种在群体中比例上升的目的。 一些有特定物质产生能力的菌种，不容易富集，只有通过大量艰苦的工作筛选取得。 其它混合菌发酵生产 Arthrobacter simplex（简单节杆菌）和Streptomyces roseochromogenes（玫瑰产色链霉菌）混合培养进行甾体转化 Propionibacterium shermanii（谢氏丙酸杆菌）和Bacillus mesentericus（马铃薯芽孢杆菌）或E. coli的混合培养可生产颉氨酸 Corynebacterium glutamicum（谷氨酸棒杆菌）和E. coli的混合培养可生产组氨酸 Cellulomonas flavigena（产黄纤维单胞菌）和Pseudomonas putida（恶臭假单胞菌）的混合培养可分解97－98%的预处理稻草粉，以生产单细胞蛋白 Trichoderma viride（绿色木霉）408.2和Aspergillus oryzae（米曲霉）3.042混合曲可以提高酱油