微生物知识员工培训课件祥解.ppt

磷 以土霉素为例，培养中溶磷含量对菌体和效价单位有着相当大的影响。在种子和发酵培养基中，溶磷主要存在于3种组份：玉米浆、高温豆饼粉、磷酸二氢钾。注：豆饼粉中的溶磷在炒制过程中，一部分分解为小分子物质，可以被检测出来。另一部分仍以各种有机大分子的形式存在，无法测量。 培养基中溶磷的计算与实际测量： ①豆粉中磷含量=豆粉(配比g/ml)×含量(ug/g) 高温黄豆饼粉磷含量参考值：2600ug/g ②玉米浆磷含量=玉米浆(配比g/ml)×含量(ug/g) 玉米浆干物质磷含量的参考值：12000ug/g ③ 磷酸二氢钾中磷含量=227941×配比(g/ml) 培养基中磷的总量(ug/ml)=①+②+③ 土霉素发酵培养基：理论计算，溶磷116，生化测定为92.6。 磷酸盐调节 磷酸盐不仅是菌体生长的主要限制性营养成分，还是调节次级代谢产物生物合成的重要因素。过量的磷酸盐也象葡萄糖一样抑制次级代谢产物的合成，这种抑制作用被称为磷酸盐调节。 在发酵生产过程中（以土霉素为例），补入磷源后，尾气中CO2升高，活菌数升高。但补入过多，会使生长转入初级代谢，从而影响效价增长。 筛选耐受高磷酸盐的生产用菌株，对于生产会有很大的帮助作用（例如在补料过程）。 生长因子 生长因子 一类微生物生命活动过程中调节微生物正常代谢所必需、需要量不大的、但不能用简单的碳源或氮源自身合成的有机营养物。 广义生长因子 维生素、卟啉、碱基、氨基酸、嘌呤、嘧啶及其衍生物、C4~C6脂肪酸、营养缺陷型氨基酸 狭义生长因子 维生素 生长因子来源 酵母膏（yeast extract）、牛肉膏（beef extract）、麦芽汁（malt extract）、玉米浆（cornsteep liquor）、蔬菜汁、麸皮、米糠等。 水 1）溶剂和运输介质，营养物质吸收及代谢物分泌 2）参与细胞内的生化反应 3）维持蛋白质、核酸稳定天然构象 4）热的良好导体，控制细胞内温度变化 5）维持细胞自身正常形态 6）控制酶、微管、鞭毛等多亚基结构组装和解离 1.2.3 培养基（medium） ◆定义：应科研或生产的需要，由人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质（混合养料）。 ◆用途：促使微生物生长；积累代谢产物；分离微生物菌种；鉴定微生物种类；微生物细胞计数；菌种保藏；制备微生物制品。 ◆任何培养基都应具备微生物所需要的六大营养要素，且应比例适当！ ◆培养基一旦配成必须立即灭菌。 培养基的选择 培养基的应用目的： 是培养菌体还是积累代谢产物？ 是实验室种子培养还是大规模发酵？ 代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物？ ☆用于种子培养的培养基营养应丰富，氮源含量宜高（碳氮比低）； ☆用于大量生产代谢产物的培养基：氮源一般应比种子培养基稍低（若发酵产物是含氮化合物时，有时还应提高培养基的氮源含量）； ☆大规模发酵用的培养基，应重视培养基中各成份的来源和价格，应选择来源广泛、价格低廉的原料，提倡以粗代精，以废代好。 营养协调 ◆培养基中营养物质的浓度 浓度过高——微生物的生长起抑制作用， 浓度过小——不能满足微生物生长的需要。 ◆各营养物质之间的比例 各营养要素之间比例（10倍递减规律） H20＞C+能源＞N源＞P、S＞K、Mg＞生长因子 10-1 10-2 10-3 10-4 10-5 10-6 ◆碳氮比（C/N）:直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累，故常作为考察培养基组成时的一个重要指标； ◆速效性氮（或碳）源与迟效性氮（或碳）源的比例。 碳氮比（C/N） 培养基分类 用于培养菌体种子的培养基营养应丰富，氮源含量宜高（碳氮比低）； ☆用于大量生产代谢产物的培养基其氮源一般应比种子培养基稍低，（但若发酵产物是含氮化合物时，有时还应提高培养基的氮源含量）；若代谢产物是次级代谢产物时要考虑是否加入特殊元素或特定的代谢产物； ☆当所设计的是大规模发酵用的培养基时，应重视培养基中各成份的来源和价格，应选择来源广泛、价格低廉的原料，提倡以粗代精，以废代好。 影响种子质量的因素 一、原材料质量：如四环素、土霉素生产中配制孢子培养基的麸皮、琼脂的牌号等。 原料质量的波动，起主要作用的是其中的无机盐含量的不同，如微量元素Mg、Ca、Ba能刺激孢子的形成。P含量的多少也影响种子的质量。 二、培养条件：温度、pH值、湿度