铁含量的测定摘要.docVIP

铁含量的测定 一、实验原理 铁的吸光光度法所用的显色剂较多，有邻二氮菲（又称邻菲罗啉、邻菲绕啉）及其衍生物、磺基水杨酸、硫氰酸盐等。其中邻二氮菲分光光度法的灵敏度高，稳定性好，干扰容易消除，是较普遍采用的一种方法。在pH值为2—9的溶液中，Fe2+可与邻二氮菲生成极稳定的橙红色络合物[Fe(Phen)3]2+???????????该络合物在波长510mm处有最大吸收，其吸光度与铁含量成正比，可用比色法测定。 二、试剂和器材 10%盐酸羟胺溶液（用时配制）；0.12%邻菲罗啉显色剂；乙酸钠溶液（1mol/L）；HCl溶液（2mol/L）；HCl溶液（1:1）。 铁标准储备液；铁标准使用液； 比色管（50ml），电子天平，分光光度计。 三、实验步骤 1、样品处理 精确称取样品3~5g，用干灰化法灰化后，加少量水润湿，加盐酸溶液（1:1）10mL溶解，移入100mL容量瓶中，用水冲洗坩埚3~4次，并入容量瓶中，用水定容后过滤。 2、标准曲线的绘制 吸取10ug/mL的铁标准使用液0、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL，置于6个50mL比色管中，分别加入1mL盐酸羟胺溶液、2mL邻菲罗啉显色剂、5mL乙酸钠溶液，每加入一种试剂都要摇匀。然后用水稀释至刻度。10min后，用1cm比色皿，以不加铁标准使用液的试剂空白作参比，在510nm波长处测定各溶液的吸光度。以铁含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。 3、测定 准确吸取上述待测溶液1~5mL于50mL比色管中，按标准曲线的绘制步骤，加入各种试剂，测定吸光度，在标准曲线上查出相应的铁含量（ug）。 4、结果计算 x= m0/(m× V 1/ V2) ×100 x—样品中铁的含量，ug/100g； m0—从标准曲线上查得测定用样液相应的铁含量，ug； V 1—测定用样液的体积，ml； V2—样液定容的总体积，ml； m—样品质量，g 四、注意事项 1. 应该注意显色时所加试剂的顺序不能改变，否则影响测定结果 2. 由于高氯酸对显色剂有干扰，故不能采用硝酸-高氯酸体系消化样品，可采用硝酸-盐酸体系。 五、思考题 1.怎样用吸光光度法测定水样中的全铁（总铁）和亚铁的含量？ 2.作标准曲线和进行样品实验时，加入试剂的顺序能否任意改变？为什么？ 游离氨基酸的测定 一、实验原理 氨基酸是食品中的主要成分之一，这是因为它不仅对食品的营养有重要的影响，而且对其风味也有重要的作用。因此在评价食品质量、加工及储藏工艺等方面常要测定氨基酸容量。 本法是根据氨基酸在PH=8.04的缓冲溶液中与茚三酮同时加热，α—氨基氮与茚三酮形成紫色的络合物，其反应机理如下： 二、试剂和器材 1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液；1/15mol/L磷酸二氢钾溶液；1/15mol/L磷酸缓冲液（pH=8.04）；茚三酮试剂； 锥形瓶，25ml比色管，移液管。 分光光度计，电子天平。 三、实验步骤 1、样品处理 准确称取蔬菜磨碎样1.000g左右，放在200mL锥形瓶中，加入煮沸蒸馏水80mL，于沸水浴中浸提30min，然后过滤、洗涤，滤液入100mL容量瓶中快速冷却至室温，最后用水定容至100mL，摇匀即为供试液。 2、测试 取供试液1mL置于25mL比色管中，加pH=8.04的磷酸缓冲液0.5mL，加茚三酮试剂0.5mL，摇匀，在沸水浴中加热15min,。待冷却后加蒸馏水定容至刻度。以蒸馏水代替供试液作为空白对照。 于570nm波长处以1.0cm比色杯测定吸光度。 3、标准曲线的绘制 准确称取赖氨酸100mg,溶于100mL水中，然后用水稀释成如下浓度：25ug/mL、50ug/mL、100ug/mL、200ug/mL、300ug/mL、400ug/mL。分别取1.0mL置于25mL比色管中，然后同上处理，测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以每毫升中所含赖氨酸的质量为横坐标绘制标准曲线。 4、样品中氨基酸含量的计算 cF X= —— ⅹ100 m x—样品所含氨基酸的量，mg/100g c—在标准曲线上所查得的每毫升被测试样中氨基酸的量，mg F—稀释倍数 M—样品质量，g 四、注意事项 水浴中加热时，必须将容器极大部分浸入水浴，严格控制时间15min和温度100℃，比色要在2h内完成。 实验一 油脂酸价的测定 一、实验原理： 油脂由于光和热或微生物的作用而被水解，产生游离脂肪酸从而降低了油脂品质，严重时候甚至发生酸败而不能食用。酸败程度的大小用酸价来表示。酸价的定义是指中和1g油脂中游离脂肪酸所需要的氢氧化钾的质量（mg）。 油脂中的游离脂肪酸与氢氧化钾发生中和反应，根据氢氧化钾标准溶液的消耗量可计算出游离脂肪酸的量。 二、试剂和器材 0.