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三、动物细胞工程 (一).动物细胞培养 (二).动物细胞融合 (三).单克隆抗体 (四).细胞核、胚胎移植 总结: ①植物组织培养是植物细胞工程技术的基础。 ②动物细胞培养 是各种动物细胞工程技术的基础。 ③为达到特定的目的,许多细胞工程技术往往需要同时运用。 已知细胞合成DNA有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤阻断,人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞尽管没有S途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂交瘤细胞,请回答: (1)试管中除融合的杂交瘤细胞外,还有_____________种融合细胞。 (2)设计一方法(不考虑机械方法),从培养液中分离出杂交瘤细胞,并说明原理。 方法: 原理: 试试身手 解析: (1)试管中有人的淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞,在促溶剂的作用下,可能出现以下3种细胞的融合情况,人的淋巴细胞和淋巴细胞融合,小鼠的骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合,人的淋巴细胞和小鼠的骨髓瘤细胞融合,实验需要的是第3种细胞,即杂交瘤细胞; (2)要将杂交瘤细胞分离出来,可以在培养液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞;加入氨基嘌呤后,使D合成途径阻断,仅有D合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。 变式训练 生产单克隆抗体时,要在培养液中加入某种试剂才能筛选出杂交瘤细胞,因为该试剂 A.能抑制淋巴细胞和杂交瘤细胞的DNA复制 B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C.选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成 (3)将分离出的杂种细胞在不同的条件下继续培养,获得A、B、C三细胞株,各细胞株内含有的人染色体如下表所示(“+”有,“-”无) 细胞株 人染色体编号 1 2 3 4 5 6 7 8 A株 + + + + - - - - B株 + + - - + + - - C株 + - + - + - + - 测定各细胞株内人体所具有的5种酶的活性,结果是:①B株有a酶活性;②A、B、C株均有b酶活性;③A、B株有c酶活性;④c株有d酶活性;⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因影响,则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的______、_______、_______、_______和_______号染色体上。 解析: (3)B株有a酶活性,通过表格可以看出B株有6号染色体而A、C株没有,说明控制a酶活性的基因位于6号染色体上。控制其它酶的基因所在的染色体位置以此类推。 答案:6;1;2;7;8。 人有了知识,就会具备各种分析能力, 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书,广泛阅读, 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍,我们能丰富知识, 培养逻辑思维能力; 通过阅读文学作品,我们能提高文学鉴赏水平, 培养文学情趣; 通过阅读报刊,我们能增长见识,扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操, 给我们巨大的精神力量, 鼓舞我们前进。 * 提问: 植物细胞工程常用的技术手段有哪些? 植物组织培养, 植物体细胞杂交 这些技术的理论基础: 植物细胞的全能性 动物细胞全能性如何? 二、动物细胞工程 常用技术 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体 胚胎移植 核移植 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 (一)动物细胞培养 阅读第70页:动物细胞培养,思考回答下列问题 : (1)动物细胞培养液成分 ? (2)动物细胞培养过程? (3)原代培养与传代培养、细胞株与细胞系的区别? (4)动物细胞培养的应用? 观看示意图简述融合过程? 2、诱导动物细胞融合的方法 3、动物细胞融合的用途 制备单克隆抗体 :仙台病毒 紫外线 丧失感染活性(不感染细胞) 保留融合活性(诱导细胞融合) 物理法 化学法 生物法 阅读课本第71-72页思考: (1)请概括单克隆抗体的概念 (2)根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的 实验方案,思考实验过程与原理? (3)为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合?单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞 工程技术手段?制备过程为何要经过两次筛选? (三)单克隆抗体 提出问题:长期以来,人们为了获得抗体,采用的是把某种抗原反复注射到动物体内,然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体,不仅产量低,而且抗体的特异性差,纯度低,反应不够灵敏。 1.概括单克隆抗体的概念 单:单个细胞 克隆
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