实验性肝癌中比较槐耳和IL__2对PTEN和IL__2R阳性细胞的影响;.ppt

前言  本课题拟通过诱癌剂诱导大鼠肝癌，并通过应用槐耳清膏和IL-2干预癌形成过程，诱癌20周后观察肝组织的病理变化、IL-2R阳性细胞的表达情况以及PTEN表达水平，从而探讨与比较槐耳与IL-2对于肝癌形成与发展的影响，及其可能的作用机制。 材料与方法 1 研究对象 2 主要试剂 3 方法 免疫组化试剂 IL-2R/ CD25α链单克隆抗体（NeoMarkers公司）、 即用型免疫组化二步法染色试剂盒 （福州迈新 KIT-9801）。 1) 动物实验 2) 常规切片制作 3) HE染色及镜下观察 4) 免疫组织化学染色检测IL-2R阳性细胞 5) RT-PCR检测PTEN表达 6) 统计分析 实验分组 ① 正常对照组 (G1) ② 单纯诱癌组 (G2) ③ 诱癌加槐耳清膏组 (G3) ④ 诱癌九周后槐耳清膏组 (G4) ④ 诱癌九周后IL-2组 (G5) 免疫组化二步法 抗原修复：柠檬酸盐缓冲液（pH6.0）煮沸20min IL-2R α链单克隆抗体（工作浓度：1︰400）37℃孵育30min，4℃过夜 捷达形态分析系统计数IL-2R阳性细胞数 结果 1 病理观察 2 免疫组化结果观察 3 RT-PCR检测PTEN表达 4 比较IL-2R阳性细胞数与PTEN相对表达