沙蟾毒精抑制血管生成的作用.pdfVIP

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 11, 46 (5) : 527533 ·527 · 沙蟾毒精抑制血管生成的作用 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 3 1, 2 1, 2* 刘俊珊 , 张冬梅 , 陈敏锋 , 李满妹 , 罗青岛 , 栗原博 , 叶文才 ( 1. 暨南大学中 及天然药物研究所, 广东 广州 510632; 2. 暨南大学中 效物质基础及创新药物研究 广东省高校重点实验室, 广东 广州 510632; 3. 广州市天河区妇幼保健院, 广东 广州 510632) 摘要: 探讨沙蟾毒精 (arenobufagin) 对体内外血管生成的抑制作用。采用MTT 法检测沙蟾毒精对人鼻咽癌 细胞 (CNE-2) 、人喉癌细胞 (Hep2) 、人神经母细胞瘤 (SH-SY5Y) 、人结肠癌细胞 (LOVO) 、人前列腺癌细胞 (PC-3 及 DU 145) 和人脐静脉内皮细胞 (HUVECs) 的细胞毒性及运用光学显微镜观察细胞形态的变化, 发现沙 蟾毒精剂量依赖性抑制CNE-2、Hep2 、SH-SY5Y、LOVO 、PC-3 、DU 145 和HUVECs 增殖, 且在对人癌细胞亚 细胞毒浓度下能够有效抑制HUVECs 的增殖。采用鸡胚尿囊膜 (chick embryo chorioallantoic membrane, CAM) 模型观察新生血管的生成, 结果发现沙蟾毒精作用 24 h 后, 尿囊膜新生血管生成明显减少。采用细胞周期分析 法观察到沙蟾毒精阻滞HUVECs 于 G /M 期, 且随着浓度增加, 细胞出现sub-G 凋亡峰。运用流式细胞术检测 2 1 沙蟾毒精作用 HUVECs 后的凋亡现象以及线粒体膜电位的变化, 确证沙蟾毒精呈时间和剂量依赖性诱导 HUVECs 凋亡, 同时检测到线粒体膜电位下降。Western blotting 检测发现, 沙蟾毒精作用HUVECs 后, 凋亡标志 分子PARP 被切割。上述研究表明, 沙蟾毒精具有明显的体内外抑制血管生成作用, 其抑制作用可能与诱导血管 内皮细胞周期阻滞及凋亡有关。 关键词: 沙蟾毒精; 血管生成; 鸡胚尿囊膜; 周期阻滞; 细胞凋亡 中图分类号: R963 文献标识码:A 文章编号: 05 13-4870 (20 11) 05-0527-07 Anti-angiogenetic effect of arenobufagin in vitro and in vivo 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 3 LIU Jun-shan , ZHANG Dong-mei , CHEN Min-feng , L