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基因工程及相关生物制品 郭 秋 岑 概 念 基因工程原理 就是通过基因重组的方式将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序。 供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件 动画演示 基因工程相关生物制品 基因工程疫苗 传统疫苗 传统疫苗与新型疫苗的区别: 传统疫苗 ①疫苗的研制则主要是通过人体实验从经验与失败中获得。 ②对于免疫保护机制不明确,有潜在致癌性或免疫病理作用,以及病原不能或难于培养的疫苗,使用传统疫苗技术就很难研制成功。 (一)艾滋病(AIDS)疫苗 (1)研究的三阶段: ①最早使用其膜抗原gp120(Glucose protein 120) ②膜抗原加其他能诱发细胞免疫抗原的多抗原疫苗的复杂设计; ③在泰国使用gp120亚单位疫苗数千人免疫接苗无效后,改为先用重组痘病毒ALVA(疫苗注射后),再使用gp120亚单位疫苗加强,80%以上的人产生了特异的体液和细胞免疫反应。 (2)HIV感染特点: ①HIV直接感染破坏免疫细胞; ②HIV变异极快。 (3)AIDS疫苗研究方向: ①能诱发有效的中和抗体,阻止或大部阻止HIV感染免疫细胞; ②能诱发强细胞免疫; ③中和抗体屏障被部分突破时能有效清除被感染细胞,是研究中应统筹考虑的。 谢 谢! * 基因重组(gene recombination)是指DNA片段在细胞内、细胞间,甚至在不同物种之间进行交换,交换后的片段仍然具有复制和表达功能的过程。 基因工程(genetic engineering)是指采用人工方法将不同来源的DNA进行重组,并将重组后的DNA引入宿主细胞中进行增殖或表达的过程。又称为重组DNA技术(recombinant DNA technique )或分子克隆(molecular cloning)。 基因工程的操作过程 酶切 连接 转化 扩增 检测 目的基因的获取 克隆载体的构建 外源基因与载体的连接 (体外重组) 重组DNA导入受体菌 转化子的筛选和鉴定 克隆基因的表达 基因工程生物制品 预防霍乱 口服重组B亚单位菌体霍乱菌苗 预防乙肝 乙肝疫苗(CHO, 酵母) 诊断试验、肿瘤导向治疗 单克隆抗体 抗组织损伤 超氧化物歧化酶 激活、剌激各类白细胞 白细胞介素 抗病毒感染及某些肿瘤 干扰素(? 1b, ?2a, ? 2b, ?) 治疗糖尿病 胰岛素 治疗侏儒症 生长素 刺激细胞生长与分化 生长因子(bFGF, EGF) 剌激白细胞生成 促红细胞生成素 剌激白细胞生成 颗粒细胞-巨噬细胞集落剌激因子 促进凝血 血液因子VIII 抗凝 组织胞浆素原激活剂 功 能 产 品 减毒活疫苗 灭活疫苗 亚单位疫苗 基因工程疫苗 基因工程亚单位疫苗 基因工程载体疫苗 核酸疫苗 基因缺失疫苗 蛋白质工程疫苗 新型疫苗 ①新型疫苗则是在分子生物、分子免疫学、蛋白化学以及相应的生物高技术基础上发展起来的,重组DNA技术促进了疫苗生产技术的发展。 ②目前新型疫苗的研究主要集中在改进传统疫苗和研制传统技术不能解决的新疫苗两个方面,包括肿瘤疫苗、避孕疫苗及其它非感染性疾病疫苗的研究,其中发展治疗性疫苗已成为新型疫苗研究的重要组成部分。 基因工程病毒疫苗的开发现状 一、急需研制的基因工程病毒疫苗 急需研制的基因工程病毒疫苗主要有十几种 需要研制的基因工程病毒疫苗 -(不需要) + 戊型肝炎 + + 丙型肝炎 + + 乙型肝炎 + +(需要) 艾滋病 + + EBV肝炎 治疗性疫苗 预防性疫苗 疾病 + + 人乳头瘤病毒感染(宫颈癌) + + 单纯疱疹病毒感染(Ⅰ、Ⅱ型) + + 巨细胞病毒感染 - + 呼吸道和细胞病毒感染 - + 埃博拉病毒感染 - + 登革热病毒感染 - + 轮状病毒感染 注:“+”表示需要,“-”表示不需要 值得使用基因工程技术进行改造的传统病毒疫苗 重组多价活疫苗,亚单位联合疫苗 联合疫苗 亚单位疫苗(病毒样颗粒) 轮状病毒 遗传重配活疫苗,重组活疫苗 腺病毒 基因缺失活疫苗 出血热 重组活疫苗,亚单位疫苗(病毒样颗粒) 狂犬(人和兽) 重组活疫苗 黄热 重组活疫苗,基因工程亚单位疫苗 麻疹 重组活疫苗,基因缺失活疫苗 水痘 基因缺失活疫苗 乙型脑炎 重组活疫苗,亚单位疫苗(病毒样颗粒) 甲型肝炎 基因缺失活疫苗,遗传重组活疫苗 流感 可能使用的基因工程疫苗类型 传统疫苗 (二)丙型肝炎病毒(HCV)疫苗 丙型肝炎感染约占人群2%左右,也就是有2000多万感染者,大部分都会转为慢性,并导致肝硬化和肝癌,危害远大于乙肝。 研究方向;
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