卵母细胞老化对小鼠体细胞克隆胚发育的影响.pdfVIP

Articles ScienceTechnologyReview 2007Vol.25No.3 (SumNo.225) 卵母细胞老化对小鼠体细胞克隆胚发育 的影响 , , 12 12 1 1 1 王二耀 ,代相鹏 ,焦丽红 ,周 琪 ,王 柳 1.中国科学院动物研究所计划生育生殖生物学国家重点实验室,北京 100080 2.中国科学院研究生院生物系,北京 100039 摘要 就小鼠卵母细胞的卵龄对克隆胚的体外发育能力的影响进行了检测,以确定最佳的取卵时间,以及取卵后进行核移植操作的可 [ ] 耐受的时间。采用 和 超排 雌鼠。在体内老化实验中,分别于注射 后 , , , 取卵用于核移植操作; PMSG hCG B6D2F1 hCG 在体外老化实验中,所有的卵均于注射 后 取出并培养,然后在 , , , 进行核移植操作。每个时间点的核移植操作 hCG 13h 在 内完成,重构的胚胎培养 后进行激活。结果显示:在体内老化实验中,注射 后 取卵,获得的克隆囊胚发育率最高, 1h 1h hCG 13h 为 , 取卵仍维持了其支持胚胎体外发育的能力,但 及更长时间后取的卵,重构后的囊胚发育率显著下降( )。注射 56.0% 15h 17h 18.1% 后 取的卵孤雌发育率最高(囊胚发育率为 ),并在 仍维持较高的孤雌发育能力,在 显著下降。在体外老化试 hCG 15h 90.1% 17h 20h 验中,于注射 后 取卵,分别于 , , 重构,都获得了较高的囊胚发育率(分别为 , , ),而在注射 hCG 13h 131517h 57.7% 52.2% 46.3% hCG 后 重构,囊胚发育率显著下降( )。体外老化的孤雌胚在注射 后 激活时囊胚发育率显著下降。结果表明:卵母细胞 20h 14.8% hCG 22h 在体内和体外老化都影响克隆胚的体外发育,最佳取卵时间为注射 后 ,取卵后立即用于重构可获得最佳囊胚发育率;体内、 hCG 13h 外老化卵支持重构胚较好发育的时间间隔是不同的,体内老化卵支持重构胚发育能力从注射 后 开始下降,体外老化卵则发 hCG 17h 生在 20h。这些结果可以指导操作,有利于在应用核移植进行其他基础研究时降低操作引起的误差。 关键词 小鼠;核移植;卵母细胞;老化 [ ] 中图分类号 , 文献标识码 文章编号 [ ]Q987Q813