X-射线致人淋巴细胞基因组差异表达及其剂量-效应关系的研究.pdfVIP

X-射线致人淋巴细胞基因组差异表达及剂量．效应关系研究 中文摘要 中文摘要中又捅芰 目的：在全基因组水平筛选辐射反应基因，验证X一射线照射诱导人外周血淋 巴细胞基因表达谱的差异及剂量一效应关系，为阐明辐射生物学效应信号通路和利 用基因表达改变作为辐射生物剂量计提供实验依据。 方法：以剂量为0．5、2．0、5．0Gy的x一射线照射正常人外周血淋巴细胞，用 片扫描和软件分析，得到3个剂量组的差异表达谱，通过统计学检验分析、倍数 变化和交集分析筛选出特异表达和共表达的差异基因。用SOM分析筛选辐射剂量 依赖性表达上调基因，用统计分析软件检验和建立剂量一效应关系模型，并用实时 荧光定量PCR进行验证。用层次聚类、Gene 辐射相关信号通路，以流式细胞术和激光共聚焦显微技术检测细胞凋亡的变化。 结果： 1．基因表达谱芯片技术检钡,tJN各剂量组差异表达基因共计522个，在共表达 的38个辐射反应基因中，18个已知基因的表达呈剂量依赖性上调，其中DDB2、 数模型。 基因表达在1．O～5．0Gy照射后存在剂量一效应关系，曲线拟合符合指数模型，与基 因芯片结果一致。在2．0GyX射线照射后该基因表达的时间变化规律为1h开始上 升，4h达到高峰，并持续到照射后72h，照后96h基因表达水平恢复正常。p21 基因表达在1．0--一一3．0Gy照射后与照射剂量存在线性剂量．效应关系。 3．芯片的数据分析表明，参与辐射反应的基因涉及DNA应激、DNA损伤修 复、细胞周期控制、细胞凋亡、免疫反应等生物学过程。其中11个基因为P53直 接调控的靶基因。信号通路分析揭示辐射主要诱导p53信号通路、Fas和热休克蛋 白介导的凋亡通路、细胞周期调控和炎症反应通路。 X-射线致人淋巴细胞基因组差异表达及剂量．效应关系研究 中文摘要 结论 1．基因芯片技术可作为筛选辐射反应基因的有力工具。 2．不同剂量x一射线照射淋巴细胞后可致基因表达谱的特征性改变，部分基因 的差异表达具有剂量．效应关系和时间．效应关系。 3．X一射线的辐射损伤效应，涉及一些特定的辐射反应基因和细胞信号通路。 特征性的辐射反应基因有可能成为潜在的辐射生物剂量计。 关键词：X．射线，电离辐射，基因芯片，辐射反应基因，基因表达， 作 者：傅春玲 指导老师：童建教授 本课题受IAEA：CPRRQ基金资助 n GenomicDifferential ofhuman andDose Induced IrradiationAbstract byX-rays ExpressionLymphocytesResponseRelationships GenomicDifferential ofHuman and ExpressionLymphocytes Dose Induced Irradiation ResponseRelationshipsbyX—rays Abstract Toscreenradiation atthelevelof tO genornics Objective responsivegenes global sear