玉米ZmCBL10的克隆及ZmCBL6和ZmCBL8的功能鉴定.pdfVIP

摘 要 类钙调磷酸酶B 蛋白（Calcineurin B-like proteins，CBLs ）做为植物特有的 Ca2+感受器，在植物响应各种非生物胁迫中发挥重要的调节作用。在玉米基因组 中至少有9 个CBL 基因，本论文首次对其中ZmCBL10 进行了克隆，并对ZmCBL6 和ZmCBL8 的抗逆功能进行了鉴定。主要研究结果如下： （1） 采用RT-PCR 方法克隆到ZmCBL10 基因cDNA 编码区，推测它由942bp 组成， 编码含有313个氨基酸残基的蛋白，其分子量为35.16KDa，等电点为5.14。 （2 ） 将ZmCBL10 cDNA 编码区构建到植物表达载体p3300 上，经菌液PCR 和质 粒酶切鉴定证明表达载体构建成功；然后将其转入根癌农杆菌 GV3101， 为进一步转化植物做好了准备。 （3 ） 采用沾花法将实验室在前期构建好的ZmCBL6和ZmCBL8表达载体转化拟南 芥，经筛选和分子检测获得转基因株系。 （4 ） 通过对ZmCBL6 和ZmCBL8 转基因株系在不同非生物胁迫条件下进行抗逆性 鉴定，证明两个基因主要在抵抗盐胁迫和水分胁迫中发挥功能，其中 Z