固氮芽孢杆菌的分离、鉴定及其glnB基因的初步的研究.pdg.pdf

摘 要 本文在中国农业大学科学蚓区采集了小麦和玉米的根际十，从北京市朝刚区洼里分别选择不 同环境采集2个黑麦草根际土壤样品和1个柳树根部的土壤样品．分别从这5个土壤样品中分离同 氮的芽孢杆菌。 首先利用芽孢杆菌中芽孢的抗热性将士壤溶液在100C沸水中煮10．15分钟，然后用选择性无 氮培养基进行初筛得到29株菌落形态不同的菌株；接着用固氯酶结构基因n／fH的特异性引物对 这29株菌进行rCR扩增，结果表明其中7个菌株具有删曰基因，这7个菌株的编号依次为：c4、 有较高(97-98％)的相似性．菌株c4和G1与Azospirillumbrasilense和 lipoferum、Azospirillum Burkholderia brasilensis具有较高(9I一100％)的相似性，菌株T7与Paenibacillusodorifer具有较高 (97％)的相似性。采用乙炔还原方法对这7个菌株的固氮酶活性进行了测定。其中4个菌株具有固 氮酶活性，菌株G2和T7的周氮酶活性相对来讲比较高，分别达到660．Onmol乙烯／rng蛋白和 固氮条件还有特于发现。 在上述试验的