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①获取目的基因(例如血清白蛋白基因) ②构建基因表达载体(在血清白蛋白基因前加特异表达的启动子) ③显微注射导入哺乳动物受精卵中 ④形成胚胎 ⑤将胚胎送入母体动物 ⑥发育成转基因动物(只有在产下的雌性个体中,转入的基因才能表达)。 思考:用基因工程技术实现动物乳腺生物反应器的操作过程是怎样的? 4.用转基因的动物作器官移植的供体 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠 (四)用转基因动物作器官移植的供体 利用基因工程对猪的器官进行改造 方法:将器官供体基因组导入某种调节因子,以抑制抗原决定基因的表达或设法除去抗原决定基因,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官 将目的基因导入到动物的受精卵里,目的基因若与受精卵染色体DNA整合,细胞分裂时,该基因随染色体的倍增而倍增,使每个细胞中都带有目的基因,使性状得以表达,并稳定地遗传给后代,从而获得基因产品。这样一种新的个体,称为转基因动物。 总结:什么叫转基因动物? 基因工程在畜牧养殖业上的应用主要是什么? 繁殖具有抗病能力、高产仔率、高产奶率和高质量的皮毛等优良品质的转基因动物。 该过程的重要步骤是通过感染或显微注射技术将重组DNA转移到动物受精卵中。 继哺乳动物乳腺反应器研发成功后,膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近,科学家培养出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答:(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是________。(2)将目的基因导入动物细胞时,通常要将外源基因导入________中,原因是___。 练 (3)通常采用__________________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。 (4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的________细胞中进行特异性表达。 (1)显微注射技术 (2)受精卵(早期胚胎细胞) 受精卵(或早期胚胎)具有全能性,可使外源基因在相应的组织细胞中表达 (3)DNA分子杂交 (4)膀胱上皮 【拓展提升】 乳房生物反应器与膀胱生物反应器 乳房生物反应器是利用转基因动物的乳汁生产药用蛋白,而膀胱生物反应器是利用转基因动物的尿液生产药用蛋白,二者的优点是:收集药用蛋白比较容易,且不必对动物造成伤害。但乳房生物反应器需是处于生殖期的雌性动物才可生产药用蛋白,而膀胱生物反应器则是任何生长期的雌雄动物均可生产。 1.在传统的药品生产中,某些药品如胰岛素、干扰素等直接从生物体的哪些结构中提取? 从生物的组织、细胞或血液中提取。 2.传统生产方法的缺点: 由于受原料来源的限制,价格十分昂贵。 三、基因工程药品异军突起 3.可利用什么方法来解决上述问题? 利用基因工程方法制造转基因的工程菌,可高效率地生产出各种高质量、低成本的药品。 工程菌:用基因工程方法,使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系。 基因工程药品包括:细胞因子(即淋巴因子如白细胞介素—2、干扰素)、抗体、疫苗、激素等 胰岛素是治疗糖尿病的特效药。一般临床上使用的胰岛素主要从猪、牛等家畜的胰腺中提取,每100kg胰腺只能提取4-5g胰岛素。用该方法生产的胰岛素产量低,价格昂贵,远不能满足社会需要。1979年,科学家将动物体内的胰岛素基因与大肠杆菌DNA分子重组,并在大肠杆菌内实现了表达。1982年,美国一家基因公司用基因工程方法生产的胰岛素投入市场,售价降低了30%-50%。 基因工程药品 —— 胰岛素 治疗侏儒症的唯一方法,是向人体注射生长激素。而生长激素的获得很困难。以前,要获得生长激素,需解剖尸体,从大脑的底部摘取垂体,并从中提取生长激素。 现可利用基因工程方法,将人的生长激素基因导入大肠杆菌中,使其生产生长激素。人们从 450 L大肠杆菌培养液中提取的生长激素,相当于6万具尸体的全部产量。 基因工程药品 —— 生长激素 干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白。干扰素几乎能抵抗所有病毒引起的感染,是一种抗病毒的特效药。此外干扰素对治疗癌症和某些白血病也有一定疗效。传统的干扰素生产方法是从人血液中的白细胞内提取,每300L血液只能提取出1mg干扰素。1980-1982年,科学家用基因工程方法在大肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素,是传统的生产量的12万倍。1987年上述干扰素大量投放市场。 基因工程药品 —— 干扰素 基因工程干扰素 传统疫苗存在许多缺点:生产过程需大量繁殖病原体,对工作人员健康造成很大威胁;病原体的减毒、灭活有可能不够彻底,导致接种者直接感染。 基因工程疫苗:将起关键作用的、序列保守的蛋白质基因重组到细菌或真核细胞内,生产蛋白质,制作成疫苗。它不使用病原体本身,所以安全,还可以把不同病原体的抗原基因重组到同一受体细胞,生产多价疫苗。
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