基因工程的应用蛋白质工程的崛起教学课件摘要.pptVIP

一、基因工程的应用成果 1．乳腺生物反应器与微生物生产的比较 类型 项目 乳腺生物反应器 微生物生产 基因结构 动物基因结构与人类基因结构相同 与人类基因结构不同 基因表达 与天然蛋白质活性没有区别 由于可能缺少 _______________ 等细胞器，产物可能不具有生物活性 内质网、高尔基体 乳腺生物反应器受生物性别的限制，若从动物尿液中提取目的基因产物则不受性别限制。 2．基因治疗 (1)成果：将腺苷脱氨酶基因转入患者淋巴细胞中，治疗复合型免疫缺陷症。 (2)方法：①体外基因治疗：先从病人体内获得某种细胞，如T淋巴细胞，进行培养。然后，在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞进行扩增培养，最后重新输入患者体内。 ②体内基因治疗：直接向人体组织细胞中转移基因的治疗方法。如1994年美国科学家利用经过修饰的腺病毒作载体，成功地将治疗遗传性囊性纤维化病的正常基因转入患者肺组织中。 (3)基因治疗的过程(以镰刀型细胞贫血症的治疗为例) ①用限制性核酸内切酶从人的DNA分子中切取血红蛋白基因。 ②用同一种限制性核酸内切酶在载体DNA上切开一个切口，用DNA连接酶将正常血红蛋白基因连接在载体DNA上，形成重组载体。 ③将携带正常血红蛋白基因的重组载体导入患者的造血干细胞中，并将重组载体插入到染色体DNA上。用选择培养基筛选出含重组质粒的造血干细胞。 ④将携带正常血红蛋白基因的造血干细胞输入患者骨髓中，此造血干细胞产生含正常血红蛋白的红细胞，以根治镰刀型细胞贫血症。 二、蛋白质工程 1．蛋白质工程的基本原理 2．蛋白质工程与基因工程的比较 项目 蛋白质工程 基因工程 区别 过程 实质 预期蛋白质功能→设计蛋白质结构→推测氨基酸序列→推测脱氧核苷酸序列 →合成DNA→表达出蛋白质 获取目的基因→构建表达载体→导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品(基因的异体表达) 项目 蛋白质工程 基因工程 区别 结果 联系 生产自然界没有的蛋白质 生产自然界中已有的蛋白质 蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。因为对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现 已知SARS是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下： (1)实验步骤①所代表的反应过程是_______。 (2)步骤②构建重组表达载体A和重组表达载体B必须使用限制性内切酶和______酶，后者的作用是将用限制性内切酶切割的_______和_____连接起来。 (3)如果省略步骤②而将大量扩增的S基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能得到表达的S蛋白，其原因是S基因在大肠杆菌中不能_____，也不能__________。 (4)为了检验步骤④所表达的S蛋白是否与病毒S蛋白有相同的免疫反应特征，可用____与_____进行抗原—抗体特异性反应实验，从而得出结论。 (5)步骤④和⑥的结果相比，原核细胞表达的S蛋白与真核细胞表达的S蛋白的氨基酸序列________(相同，不同)，根本原因是________________。 【答案】　(1)逆转录　(2)DNA连接　载体　S基因 (3)复制　合成S基因的mRNA　(4)大肠杆菌中表达的S蛋白　SARS康复病人血清　(5)相同　表达蛋白质所用的基因相同 (2009年广东高考题)(1)饲料加工过程温度较高，要求植酸酶具有较好的高温稳定性。利用蛋白质工程技术对其进行改造时，首先必须了解植酸酶的______，然后改变植酸酶的____，从而得到新的植酸酶。 (2)培育转植酸酶基因的大豆，可提高其作为饲料原料时磷的利用率。将植酸酶基因导入大豆细胞常用的方法是_____。 (3)为了提高猪对饲料中磷的利用率，科学家将带有植酸酶基因的重组质粒通过_____转入猪的受精卵中。该受精卵培养至一定时期后可通过________方法，从而一次得到多个转基因猪个体。 (4)若这些转基因动、植物进入生态环境中，对生态环境有何影响？ 【答案】　(1)分子结构及预期功能　基因　(2)农杆菌转化法　 (3)显微注射法　胚胎分割　(4)转基因生物及其产品对生物多样性、生态环境可能产生的影响主要表现在以下几方面：①转基因生物打破了物种的原有界限，改变了物质循环和能量流动，对生态系统的稳定性造成破坏； ②重组DNA与微生物杂交，可能出现对动、植物和人类有害的病原微生物；③增加目标害虫的抗性和进化速度；④转基因植物通过传粉进