VIGS介导的番茄转录因子SlDREB2基因的耐旱特征.pdfVIP

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2016-05-12 发布于安徽
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VIGS介导的番茄转录因子SlDREB2基因的耐旱特征.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2012年第12期 VIGS 介导的番茄转录因子 SlDREB2 基因的耐旱特征于国红马雪峰徐娜辛世超程宪国（农业部植物营养与肥料重点实验室中国农业科学院农业资源与农业区划研究所植物营养分子生物学实验室，北京 100081）摘要： SlDREB2 基因是利用rd29A 基因启动子的DRE 元件通过酵母单杂交技术从番茄幼苗（丽春）cDNA 文库中筛选得到的属于EREBP 家族的一个转录因子基因。利用构建病毒VIGS 载体，分别用含pBINTRB6、pTV00 ∷ - 和 SlDREB2 1 pTV00 ∷ - 重组载体的农杆菌GV310 1 菌液灌根与叶片注射法侵染番茄植株，转化7 d 后进行病毒DNA 检测与验证。测定 SlDREB2 2 了干旱胁迫下侵染成功的番茄植株与野生型株系的生理指标，并通过Real-time qPCR 分析了VIGS 介导的SlDREB2 转录因子基因的表达特征。番茄植株干旱3 周胁迫处理后测定结果表明，野生番茄中脯氨酸和可溶性糖水平要高于被VIGS 病毒侵染的番茄植株，而丙二醛水平要低于被侵染植株，并且指标显示被pTV00 ∷ - 重组载体的农杆菌GV310 1 菌液侵染的番茄植株抗旱性明显 SlDREB2 2 降低；复水1 周后，受VIGS 浸染株系丙二醛含量明显高于野生型，而可溶性糖与脯氨酸累积却低于野生型。Real-time qPCR 结果表明，经VIGS 病毒侵染过的番茄植株在胁迫处理时期SlDREB2 基因的相对表达量都明显低于野生型株系，表明番茄SlDREB2 基因保守域末端459 bp 的特异片段具有较显著的沉默效果，说明VIGS 介导的SlDREB2 基因的表达受干旱诱导，该基因可以作为抗旱型作物品种改良的有价值基因。关键词： VIGS 番茄 DREB 干旱胁迫 Real-time qPCR Profile of Drought Resistance of Tomato Transcription Factor SlDREB2 Gene Mediated by VIGS Yu Guohong Ma Xuefeng Xu Na Xin Shichao Cheng Xianguo （，， The Key Laboratory of Plant Nutrition and Fertilizers Ministry of Agriculture Chinese Academy of Agricultural Sciences Institute of ， 100081 ） Agricultural Resources and Regional Planning Beijing