LfMADS1基因对新铁炮百合‘RaizenNo.1’的遗传转化.pdfVIP

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2016-05-12 发布于安徽
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LfMADS1基因对新铁炮百合‘RaizenNo.1’的遗传转化.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第期 2014 3 LfMADS1 基因对新铁炮百合 ‘Raizen No.1 ’的遗传转化李云华刘青刘青林（中国农业大学观赏园艺与园林系，北京 100193）摘要：为了获得无花粉、重瓣百合新种质，以新铁炮百合 ‘Raizen No.1’的离体小鳞片为受体，探讨了不同水平的抗生素和抑菌素对小鳞片再生能力的影响；利用正交试验对预培养时间、菌液浓度、侵染时间和共培养时间等4 个因素的不同水平进行了筛选，优化了遗传转化体系；进行了百合花器官特性基因LfMADS1 的转化，并对转基因植株进行了分子生物学检测。结果表明，新铁炮百合小鳞片选择培养时抗生素卡那霉素（Kan ）浓度为100 mg/L ，抑菌素为羧苄青霉素（Carb ）浓度为500 mg/L。正交试验结果表明共培养时间是遗传体系中的主要影响因子；小鳞片转化的最佳条件是预培养1 d、侵染10 min、共培养5 d、菌液OD600 值 0.8。PCR 检测的结果，得到4 株转LfMADS1 反义基因的新铁炮百合株系，其中1 株已通过PCR-Southern 检测。关键词：小鳞片农杆菌介导转化卡那霉素羧苄青霉素正交试验 × Study on Genetic Transformation of LfMADS1 Gene into Lilium × formosanum‘ Raizen No.1 ’ Li Yunhua Liu Qing Liu Qinglin （Dep artment of Ornamental Horticulture and Landscap e Architecture ，China Agricultural University ，Beij ing 100 193 ） In order to create pollen-free double flowers, the in vitro bulblet scales of × ‘Raizen No. 1’were Abstract: Lilium formosanum taken as explants, the effects of Kan and Carb on regeneration from bulblet scales were studied at first. Then a orthogonal test were conducted to screening such factors as pre-culture time, bacterial concentrat