2016届《卓越学案》高考生物二轮训练：命题源8.17基因工程与细胞工程.docVIP

1．(2015·江苏两市一模)为增加油菜种子的含油量，研究人员尝试将酶D基因与位于叶绿体膜上的转运肽基因相连，导入油菜细胞并获得了转基因油菜品种。 (1)研究人员依据基因的已知序列设计引物，采用________法从陆地棉基因文库中获取酶D基因，从拟南芥基因文库中获取转运肽基因，所含三种限制酶(ClaⅠ、SacⅠ、XbaⅠ)的切点如图一所示。则用____________和________酶处理两个基因后，可得到_____端与_____端(填图中字母)相连的融合基因。 (2)将上述融合基因插入图二所示Ti质粒的T-DNA中，构建____________并导入农杆菌中。将获得的农杆菌接种在含________的固体平板上培养得到含融合基因的单菌落，再利用液体培养基振荡培养，可以得到用于转化的侵染液。 (3)剪取油菜的叶片放入侵染液中一段时间，此过程的目的是______________________________，进一步筛选后获得转基因油菜细胞，该细胞通过________________技术，可培育成转基因油菜植株。 (4)用____________法可检测转基因油菜植株中的融合基因是否成功表达。 解析：(1)由题中“已知序列设计引物”可想到PCR扩增DNA的做法。由图示中酶D基因和转运肽基因都有ClaⅠ酶切位点，想到用ClaⅠ酶酶切后，酶D基因的A端和转运肽基因的D端可用DNA连接酶