GPR30和长骨生长的关系.pdfVIP

摘 要 GPR 30 与长骨生长的关系 华中科技大学同济医学院附属同济医院甲乳外科 研究生 付 静 导 师 吴亚群 教授 目的: 检测长骨生长正常﹑活跃﹑迟缓三种生长状态下，GPR30 在长骨生长板 中的表达情况，分析其表达在各生长过程中的变化，探讨 GPR30 在长骨生长过 程中的作用。 方法: 采用丙基硫氧嘧啶(PTU)诱导法构建 SD 雌鼠去甲减后追赶生长模型组（B 组）提供长骨生长活跃状态与正常对照组比较（A 组），切除幼鼠卵巢构建去卵 巢生长模型组（D 组）提供长骨生长迟缓状态与去卵巢假手术组(C 组) 比较。测 量各组大鼠胫骨及体重﹑尾长，取平均值作线形图了解各组大鼠的生长趋势。采 用放射免疫法(RIA)检测 A 组﹑B 组大鼠血清 T4 水平及 C 组﹑D 组大鼠血清 E2 水平用于比较激素水平变化。 于 4W 、8W、11W 龄分别处死各组雌鼠，取胫骨近端生长板，经甲醛固定、 10%EDTA 脱钙、脱水、包埋、切片后对各组各生长阶段切片行 HE 染色大体观 察生长板的形态，Brdu 检测生长板软骨细胞增生情况，SABC 免疫组化法标记 生长板中 GPR30 的表达，人工计数各生长板中阳性细胞百分数，SPSS 软件分析 比较GPR30 在各组各阶段生长板中的表达差异。 结果: 1.胫骨长﹑体重﹑尾长在 A 组﹑C 组维持稳定快速增长；B 组甲减期 各指标生长速率明显低于 A 组，甲减后生长速率则高于 A 组同期大鼠的生长速 率；各指标生长速率在 D 组缓慢、平稳，低于 C 组。 2.4W 龄幼鼠血清 T4 水平 B 组较 A 组明显降低，有统计学差异（P0.05 ）,8W 1 龄二者血清 T4 水平相当，没有明显统计学差异（P0.05 ）。8W 龄血清 E2 水平 D 组较 C 组明显下降，有统计学差异（P0.05 ） 3.各时期胫骨生长板 A 组长于 B 组，C 组长于 D 组，但在 8W、11W 龄 B 组生长板长度明显增加。8W 龄 Brdu 标记的阳性细胞百分数 B 组高于 A 组，C 组高于 D 组。 4.在 4W 、8W、11W 时，GPR30 的表达在各生长组中逐渐减少，应用 SPSS 软件分析得出，在 B 组生长过程中 GPR30 减少最显著，其次为 A 组和 C 组，D 组减少程度最轻。(A 组，B 组，C 组，D 组 GPR30 表达分别 4W 龄为 22 ±7%， 17±3%，25 ±5%，12±4% ；8W 龄 19±5%，16±6%，19±7%，9 ±6% ；11W 龄 15±6%，9 ±4% ，14±5%，7 ±5% ）。 结论: 随着生长发育 GPR30 在长骨生长板中的表达逐渐减少，且生长活跃情况 下，生长板中 GPR30 的表达下降较快，说明GPR30 可能参与调节长骨生长并对 长骨生长起抑制作用。 关键词：去甲减后追赶生长；去卵巢后生长；GPR30 ；生长板 2 ABSTRACT Objection ：Test the expression of GPR30 in growth plate at three different situationsnormal growth, active growth, retarded growth and analysis the dynamic changes to explore the relationship between GPR30 and long bone growth. Method Catch-up growth after hypothyroidism model (B)was established by feeding wit