慈姑45SrDNA和端粒序列检测及核型分析.pdfVIP

植物科学学报　 ２０１５ꎬ３３(４):５０７~５１２ Ｐｌａｎｔ ＳｃｉｅｎｃｅＪｏｕｒｎａｌ － 　 　 ＤＯＩ:１０１１９１３/ ＰＳＪ２０９５ ０８３７２０１５４０５０７ 慈姑４５Ｓ ｒＤＮＡ和端粒序列检测及核型分析 佘朝文１ꎬ２ꎬ３ ∗ꎬ蒋向辉１ꎬ２ꎬ３ (１.怀化学院民族药用植物资源研究与利用湖南省重点实验室ꎬ湖南怀化 ４１８００８ꎻ２.怀化学院湘西药用植物与 民族植物学湖南省高校重点实验室ꎬ湖南怀化 ４１８００８ꎻ３.怀化学院生命科学系ꎬ湖南怀化 ４１８００８) 摘　 要:以４５Ｓ ｒＤＮＡ和拟南芥型端粒序列为探针对慈姑(Ｓａｇｉｔｔａｒｉａ ｔｒｉｆｏｌｉａ Ｌ.)有丝分裂中期染色体进行单色和双 色荧光原位杂交分析ꎬ 并用银染方法检测慈姑４５Ｓ ｒＤＮＡ位点的表达ꎬ 最后结合染色体测量数据和４５Ｓ ｒＤＮＡ杂交 信号建立慈姑的核型ꎮ 结果显示ꎬ 慈姑的单倍基因组总长度为 ７６９ ± １３８ μｍꎬ 最长染色体为 １１５５ ± ＝ ＝ ＋ ＋ ＋ ０１０ μｍꎬ 最短染色体为４５４ ±０２７μｍꎻ 慈姑的核型公式为: ２ｎ ２２ ２ｍ ２ｓｍ １４ｓｔ ４ｔꎬ 核型不对称 性参数ＣＩ、 Ａ１、 Ａ２、 Ａｓ Ｋ(％)、 ＡＩ分别为１９８６ ±１１０６、 ０７２、 ０２７、 ７８８２、 １５２９ꎬ 核型属于Ｓｔｅｂｂｉｎｓ类 型中的３Ｂ型ꎮ 慈姑具有３对４５Ｓ ｒＤＮＡ位点ꎬ 分别位于第８、 ９、 １０号染色体的短臂末端ꎮ 拟南芥型端粒序列 的杂交信号出现在慈姑每一条染色体的长、 短臂末端ꎮ 银染检测到６个 Ａｇ￣ＮＯＲ和６个核仁ꎬ 表明３对４５Ｓ ｒＤＮＡ 位点在间期核都有表达ꎮ 本研究结果为药食兼用植物慈姑提供了分子细胞遗传学基础资料ꎮ 关键词:慈姑ꎻ 核型ꎻ ４５Ｓ ｒＤＮＡꎻ 端粒序列ꎻ 荧光原位杂交ꎻ 银染 中图分类号:Ｑ９４３　 　 　 　 　 文献标识码:Ａ　 　 　 　 　 文章编号:２０９５￣０８３７(２０１５)０４￣０５０７￣０６ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ４５Ｓ ｒＤＮＡ ａｎｄ Ｔｅｌｏｍｅｒｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｋａｒｙｏｔｙｐｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓａｇｉｔｔａｒｉａ ｔｒｉｆｏｌｉａ Ｌ. ＳＨＥ Ｃｈａｏ￣Ｗｅｎ１ꎬ２ꎬ３ ∗ꎬＪＩＡＮＧＸｉａｎｇ￣Ｈｕｉ１ꎬ２ꎬ３ (１.Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｔｈｎｏｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ Ｈｕｎａｎ ＰｒｏｖｉｎｃｅꎬＨｕａｉｈｕａꎬＨｕｎａｎ４１８００８ꎬＣｈｉｎａꎻ ２. Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＸｉａｎｇｘｉ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｐｌａｎｔ ａｎｄ Ｅｔｈｎｏｂｏｔａｎｙ ｏｆ Ｈｕｎａｎ Ｈｉｇｈｅｒ ＥｄｕｃａｔｉｏｎꎬＨｕａｉｈｕａꎬＨｕｎａｎ４１８００８ꎬＣｈｉｎａꎻ ３. Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｉｆｅ ＳｃｉｅｎｃｅｓꎬＨｕａｉｈｕａ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＨｕａｉｈｕａꎬＨｕｎａｎ４１８００８ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ: Ｔｏ ｐｒｏｖｉｄｅ ｂａｓｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃ ｄａｔａ ｆｏｒ Ｓａｇｉｔｔａｒｉａ ｔｒｉｆｏｌｉａ Ｌ.ꎬ ｓｉｎｇｌｅ￣ ａｎｄ ｄｕａｌ￣ｃｏｌｏｒｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ (ＦＩＳＨ) ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｎ ｍｅｔａｐｈａｓｅ ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ ｏｆ Ｓ. ｔｒｉｆｏｌｉａ ｗｉｔｈ ４５Ｓ ｒＤＮＡ ａｎｄ Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ￣ｔｙｐｅ ｔｅｌｏｍｅｒｅ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄꎬｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆ ｔｈｅ４５Ｓ ｒＤＮＡ ｓｉｔｅｓｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｕｓｉｎｇ ｓｉｌｖ