抗氧化酶过表达对趋磁螺菌MSR-1耐氧性的影响.pdf

生物技术通报 BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 2010 10 MSR1 刘聪 李颖 李季伦 姜伟 田杰生 ( , 100 193) : 在格瑞斯瓦尔德磁螺菌(M agne tosp irillum g ryp h isw a ldense) M SR1 中分别过量表达 3种抗氧 酶 F e超氧 物歧 酶谷胱甘肽过氧 物酶和过氧 氢酶H P II, 并分析过量表达这 3种酶对趋磁螺菌M SR1耐氧性的影响通过 PCR 分别扩 增大肠杆菌DH 5的 F e超氧 物歧 酶( sodB) 谷胱甘肽过氧 物酶( b tuE) 过氧 氢酶H P II( katE) 基因序列, 将前两 个片 段分别连接到广宿主质粒 pBBR 1M CS2 上, 后一个片段连接到广宿主质粒 pBBR 1M CS5 上, 构建成表达质粒 pBBR 1M CS sodB, pBBR 1M CSbtuE 和 pBBR 1M CSkatE, 将 3 个质粒通过双亲接合转移的方法分别转入趋磁螺菌M SR13种抗氧 酶过 表达对趋磁螺菌M SR1耐氧性影响的试验结果为过量表达 Fe超氧 物歧 酶对菌体生长影响不明显 过量表达谷胱甘肽过 氧 物酶过氧 氢酶 HP II使趋磁螺菌M SR1致死上述试验结果表明抗氧 酶系在菌体耐氧过程中的全局协调调控的重 要性 : 趋磁螺菌M SR1 F e超氧 物歧 酶 谷胱甘肽过氧 物酶 过氧 氢酶 HP II Effects ofAntioxidantEnzyme Overexpression on Oxygen Tolerance ofM agnetosirillum g ryp hiswa ldense MSR1 L iu Cong L i Y ing L i J ilun J iang W ei T ian J iesheng (S ta teK ey La bora tory of Ag ricu ltura lB iotech nology, Ch ina Ag ricu ltural Un iversity, College of B iolog ica l S c ien ces, B ei ing 10 0193) Abstrac:t In th is stu dy, genes of F esup erox ide d ism utase ( sodB ) , g luta th ioneperox idase ( btuE ) and cata lase HP II ( katE) w ere ov erexpressed in theM ag ne tosp irillum g ryp h isw a ldense M SR1, resp ective ly. T he effec ts o f these three enzym es overexpress ion on the oxygen tolerance o fM SR1 w ere analyzed. sodB, btuE and katE gene w ere am plified by PCR from E. co li DH5. sodB and butE gene w ere connec ted w ith pBBR 1M CS2, and katE gene w as connected w ith pBBR 1M CS5 to con stru ct the express ion plasm id pB BR 1M CSsodB, pBBR 1M CSb tuE and pBBR 1M CSkatE, and then, these three expression plasm ids w ere tran sferred to M ag ne tosp iril lum g ryp h isw a ldense M SR1 by conjugati