诺卡氏菌酰胺酶在大肠杆菌中的重组表达及在锦纶改性中的应用.pdf

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2013 6 诺卡氏菌酰胺酶在大肠杆菌中的重组表达及其在 锦纶改性中的应用 1，2 1 1 1 郭迎春   陈晟  宿玲恰  吴敬 （1. 江南大学 食品科学与技术国家重点实验室 工业生物技术教育部重点实验室，无锡 214122 ； 2. 江南大学生物工程学院，无锡 214122） 摘 要 ： 将来源于诺卡氏菌 （ ）的酰胺酶在 中进行了重组表达。构建了重组表达质粒pET24a/AMID ， Nocardia farcinica E. coli 转入宿主菌E. coli Origami （DE3 ）中，0.4 mmol/L IPTG ，25 ℃诱导20 h 后，酶活为1.02 U/mL。在此基础上，考察了重组酰胺酶在 PA 改性中的应用。通过优化温度、pH、处理时间和摇床转速等因素对酶处理的影响，确定了酶处理的最优条件为 ：40 ℃，pH7.5 ， 处理时间1 h ，摇床转速100 r/min ，在该处理条件下，与磷酸缓冲液对比，PA 吸水高度提高了8.7 cm ，上染率提高了23.1% ，基 本能够达到碱处理的效果。 关键词 ： 酰胺酶 诺卡氏菌 重组表达 大肠杆菌 PA 改性 Recombinant and Expression of Amidase from Nocardia farcinica in E. coli and Application on PA Modification 1，2 1 1 1 Guo Yingchun Chen Sheng Su Lingqia Wu Jing （1. State Key Laboratory of Food Science and Technology ，Industrial Biotechnology Key Laboratory of the Ministry of Education ，Jiangnan University ，Wuxi 214 122 ；2. Institute of Biological Engineering ，Jiangnan University ，Wuxi 214 122 ） Abstract:  The amidase from Nocardia farcinica was recombined and expressed in E. coli. The recombinant vector pET24a/AMID was constructed and transferred into E. coli Origami （DE3 ）. After 20 h induction （0.4 mmol/L IPTG ，25 ℃ ），the amidase activity was reached about 1.02 U/mL.