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生物技术通报
· · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 11
研究报告 年第 期
青霉菌聚半乳糖醛酸酶基因在毕赤酵母中的
表达及酶学性质研究
1，2 2 2
曹威 张宇宏 张伟
1 2
( ， 07 100 1 ; ， 100081)
河北农业大学食品科技学院 保定 中国农业科学院生物技术研究所 北京
: (Penicillium sp． )， PCR TAIL-PCR
摘 要 筛选得到一株能分解果胶的青霉菌 使用简并引物 和 方法从该菌中克隆了一
pgp1。pgp1 1 225 bp ， 2 ， cDNA 1 104 bp ， 367
个聚半乳糖醛酸酶基因 基因全长 包含 个内含子 其 全长 编码 个氨基酸和一个终
， 18 。 pgp1 pPIC9 ， 。 3
止密码子 前 个氨基酸为信号肽序列 将 基因连接 载体 在巴斯德毕赤酵母表达系统中进行了异源表达 在
L ， 700 U / mL 。 ， PGP1 pH 5. 0 ，
发酵罐水平 培养基中聚半乳糖醛酸酶活力达到 酶学性质测定表明 重组酶蛋白 的最适 为 在
pH4. 0 － 6. 0 1 h ， 90% ; 38℃ ， ，PGP1 K = (1. 172 ± 0. 169)
下处理 后 剩余酶活力超过 最适温度为 以聚半乳糖醛酸为底物 的 m
mg / mL ，Vmax = (0. 061 ± 0. 002)mg / min / mL 。
:
关键词 聚半乳糖醛酸酶 青霉菌 毕赤酵母 异源表达
Cloning ，Expression and Characterization of a Polygalacturonase from
Penicillium sp． in Pichia p astoris
Cao Wei1，2
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