利用原生质体融合技术选育淀粉发酵产DHA的新型裂殖壶菌.pdfVIP

利用原生质体融合技术选育淀粉发酵产DHA的新型裂殖壶菌.pdf

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生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 2 :84-90 利用原生质体融合技术选育淀粉发酵产 DHA 的新型 裂殖壶菌 1 1 1 2 2 2 王迪  路福平  王海军  李德茂  陈树林  张可 (1. 天津科技大学生物工程学院,天津 300457 ;2. 中国科学院天津工业生物技术研究所 天津市工业生物系统与 过程工程重点实验室,天津 300308) 摘 要 : 以生产DHA 的裂殖壶菌 ( )B4D1和黑曲霉 ( )CGMCC 3.316为出发菌株,利用原生 Schizochxtrium Aspergillus niger 质体融合技术选育可以利用淀粉发酵生产DHA 的新型裂殖壶菌。用裂解酶制得了两亲本的原生质体,通过研究两亲本培养时间、 培养方法、酶解时间等条件对原生质体产量影响的基础上,以PEG 介导进行了原生质体的融合,最终确定了原生质体融合最佳条 件为40% 的 PEG6000, 融合温度30℃,融合时间为10 min,在此条件下融合率可达 1.9%。通过比较菌落外观、颜色、形态以及 分离培养筛选获得了一株利用淀粉裂殖壶菌融合子。经过RAPD 验证表明B4D1 与CGMCC 3.316 发生了重组,融合菌株表达了更 多源于B4D1 的遗传信息。 关键词 : 裂殖壶菌 ;DHA ;原生质体 ;融合;淀粉 DOI :10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.02.012 Screening a New Type of Schizochxtrium Strain Producing DHA Using Starch by Protoplast Fusion Technology 1 1 1 2 2 2 Wang Di Lu Fuping Wang Haijun Li Demao Chen Shulin Zhang Ke (1. College of Biotechnology ,Tianjin University of Science Technology ,Tianjin 300457 ;2. Tianjin Key Laboratory for Industrial Biological Systems and Bioprocessing Engineering ,Tianjin Institute of Industrial Biotechnology ,Chinese Academy of Sciences ,Tianjin 300308 ) Abstract : Schizochxtrium B4D1 and Aspergillus niger CGMCC 3.316 as original strains, a new strain of Schizochxtrium was selected using starch for producing DHA. The protoplasts from two parents strains were obtained respectively with Lysing en

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