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生物技术通报
· · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 7
研究报告 年第 期
杜氏盐藻 GAPDH cDNA 的克隆鉴定及其
启动子功能表达载体的构建
1,2 3 4 3 2
贾岩龙 牛杰 贾俊英 邱乐乐 薛乐勋
1 2
( , 453003 ; , 450052 ;
新乡医学院药学院药理学教研室 新乡 郑州大学医学院细胞生物学研究室 郑州
3 4
, 453003 ; , 453003 )
新乡医学院基础医学院形态学实验室 新乡 新乡医学院三附院眼科 新乡
: 3- (Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase ,GAPDH)
摘 要 根据藻类甘油醛 磷酸脱氢酶 氨基酸高度保守序列设计简
, 5 ,3-RACE PCR , (Dunaliella salina)GAPDH cDNA 。
并引物 采用 和巢式 的方法 得到了杜氏盐藻 全长序列 序列同源性比较
, GAPDH GAPDH
和进化树等生物信息学分析结果表明 根据获得的盐藻 的核酸序列推导的氨基酸序列与其他已知物种的 有
。 GAPDH cDNA ,
较高的同源性 定向克隆于原核表达载体的盐藻 在大肠杆菌中以融合蛋白的形式得到了高效表达 并成功构
GAPDH cat ( ) pUCGCat , GAPDH
建了由盐藻 基因启动子驱动的 氯霉素乙酰转移酶 基因表达载体 为进一步研究杜氏盐藻 基因
和启动子功能奠定了试验基础。
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