四翅滨藜Osmotin-likeProtein基因的克隆、序列分析及原核表达.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2013 2 四翅滨藜 Osmotin-like Protein 基因的克隆、序列分析 及其原核表达 王升阳  张勇  王健  刘言志  刘金亮  潘洪玉 （吉林大学植物科学学院，长春 130062） 摘 要 ： 在构建四翅滨藜 （ ）全长cDNA 文库中通过随机克隆测序并进行EST 分析基础上，得到四翅滨 Atriplex canescens 藜osmotin-like protein 的1 个cDNA 序列，命名为 。 cDNA 包含一个全长为687 bp 完整开放阅读框，编码229 个氨基 AcOLP AcOLP 酸，属于GH64-TLP-SF 超家族，是一种病程相关5 （PR-5 ）蛋白，其核酸序列与大洋洲滨藜 （ ）的osmotin-like Atriplex nummularia protein 基因的同源性为94% ，对应编码氨基酸序列同源性为87%。将得到的序列提交GenBank ，序列号为JN632587.1。与其他植 物PR-5 蛋白的氨基酸序列比对，AcOLP 具有保守的半胱氨酸残基，与二硫键的形成有关。对AcOLP 与其他植物的氨基酸序列的 进化分析表明，其与大洋洲滨藜的亲缘关系较近。将AcOLP 基因与原核表达载体pET-28a 连接，进行融合表达，在大肠杆菌BL2 1 （DE3 ）中诱导表达出分子质量约29 kD 的蛋白。 关键词 ： 四翅滨藜 Osmotin-like protein 基因克隆 序列分析 原核表达 - Cloning and Sequence Analysis of a Osmotin like Protein Gene from Atriplex canescens and Its Prokaryotic Expression Wang Shengyang Zhang Yong Wang Jian Liu Yanzhi Liu Jinliang Pan Hongyu （College of Plant Sciences ，Jilin University ，Changchun 130062 ） Abstract:  A osmotin-like protein gene was isolated based on the library from Atriplex canescens and its EST analysis, and named as AcOLP . The full length of AcOLP contained an open reading frame of 687 bp. It encoded a polypeptide of 229 amino acids, belonging to GH