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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期
2014 6
中华绒螯蟹 EsSox21b-like 基因干扰载体的构建及
原核表达制备 dsRNA
刘志强 陈洁 邱高峰
(上海海洋大学 农业部淡水水产种质资源重点实验室,上海 201306)
摘 要 : Sox (SRY-related HMG-box )基因是一类重要的转录因子,在动物的性别分化与决定、器官的发生等方面具有重要
的调控作用。 旨在利用RNA 干扰技术证实该基因的功能,将 Sox2 1b-like 基因617 bp 的片段克隆至含有两个T7 启动子的L4440
Es
载体上,构建了 Sox21b-like-L4440 干扰载体,将该重组载体转化至RNase Ⅲ缺陷型的HT 115 菌株中,经IPTG 诱导菌株体内转录,
Es
获得了 Sox21b-like 正义和反义单链RNA ,经过变性、退火形成大量双链RNA ( Sox2 1b-like-dsRNA ),能满足以后应用RNA 干
Es Es
扰试验对于 Sox21b-like 基因功能的研究。
Es
关键词 : 中华绒螯蟹 RNA 干扰 L4440 HT 115 原核表达 dsRNA
-
Construction of Interference Vector of EsSox21b like Gene from
( )
Chinese Mitten Crab Eriocheir sinensis and Preparation of dsRNA
by Prokaryotic Expression
Liu Zhiqiang Chen Jie Qiu Gaofeng
( , , , 20 1306 )
Key Laboratory of Freshwater Aquatic Genetic Resources Ministry of Agriculture Shanghai Ocean University Shanghai
Abstract: Sox (SRY-related HMG-box )gene is a kind of important transcription factor, which functions in sex determination,
organogenesis, etc. The gonad-specific expression of this novel gene suggested that it might pla
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