乳腺癌细胞雌激素受体非配体依赖性激活对来曲唑耐药的机制的研究.pdfVIP

Med J Chin PLA, Vol. 38, No. 6, June 1, 2013 　461 论　著 ·基础研究· 乳腺癌细胞雌激素受体非配体依赖性激活对来曲唑耐药的 机制研究 陈洪岩，刘芝华 [摘要]　目的　研究雌激素受体(ER)转录调节变化在乳腺癌细胞对来曲唑耐药中的作用及其机制。方法　以来曲 唑耐药细胞(M CF-7-LR- 1、M CF-7-LR-2)和对照细胞(M CF-7-A ro 、M CF-7-T)为研究对象。通过Western bl otting检测ER和 磷酸化ER [pER (Ser 118)]在两组细胞中的表达水平。通过染色质免疫共沉淀(ChIP)方法检测雌二醇(E2 )处理前后细胞中 ER与X 盒结合蛋白1(X BP- 1)增强子和三叶因子1(TFF- 1)启动子区的结合情况。通过Real-time qRT-PCR 比较XBP- 1和TFF- 1 mRNA 的表达，以及雌激素反应性基因CA 2 、GJ A 1、PGR 、CTSD mRNA 的表达。结果　与对照细胞相比，来曲唑耐药 细胞中pER (Ser 118)水平显著增加，但ER表达水平并无明显变化。ChIP结果表明，与对照细胞相比，M CF-7-LR-2细胞 中ER在非配体激活条件下(未加E 处理)及配体激活条件下(10nm ol /L E 处理4 5min)与X BP- 1增强子区及TFF- 1启动子区 2 2 的结合均显著增加。qRT-PCR结果表明，与未经E2处理的M CF-7-A ro细胞相比，耐药细胞中XBP- 1和TFF- 1表达均显著增 加；与M CF-7-T细胞相比，耐药细胞中CA 2和GJ A 1表达增高，PGR和CTSD 的表达降低。结论　在来曲唑耐药的乳腺癌 细胞中，ER 以配体非依赖方式激活，pER (Ser 118)水平增加，从而促进相关靶基因的转录，该机制在乳腺癌细胞对来 曲唑耐药的过程中发挥重要作用。 [关键词]　乳腺肿瘤；受体，雌激素；抗药性，肿瘤；X盒结合蛋白质1 ；三叶因子1 [中图分类号]　R736.8 [文献标志码]　A [文章编号]　0577-7402 (20 13)06-046 1-06 The mechanism of ligand-independent activation of estrogen receptor in letrozole-resistant breast cancer cells * CHEN Hong-yan, LIU Zhi-hua State Key Laboratory of Molecular Oncology, Cancer Institute and Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100021, China * Corresponding author, E-mail: liuzh@cicams.ac.cn This work was supported by PUMC Youth Fund and the Fundamental Research Funds for the Central Universities (2012D19) [Abstract]　Objective　To inv estigate th e fun cti ons and m ech ani sms of transcripti onal regul ati on ch anges in estrogen recep tor (E R ) on l etrozol e resi st an ce in