水稻小G蛋白OsRab5b的亚细胞定位的研究.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 11 :139-145 水稻小 G 蛋白 OsRab5b 的亚细胞定位研究 1，2 2，3 2，4 邵军丽   龙跃生   徐增富 （1. 广东医学院公共卫生学院，东莞 523808 ；2. 中山大学基因工程教育部重点实验室 有害生物控制与资源利用国家重点实验室， 广州 510275 ；3. 广州医科大学附属第二医院神经科学研究所，广州 510260 ；4. 中国科学院西双版纳热带植物园 热带植物资源可持续利用重点实验室，昆明 650223） 摘 要 ： 旨在研究水稻OsRab5b 亚细胞定位及第二位甘氨酸在蛋白定位中的作用。利用药物、细胞器标记物和示踪染料处 理OsRab5b-GFP 与OsRab5b（Gly2Ala）-GFP 的转基因BY-2 细胞，然后用激光共聚焦显微镜观察。结果表明，OsRab5b-GFP 转基 因细胞呈现出大量的分散点状结构和少量细胞质弥散信号；wortmannin 处理可以使OsRab5b-GFP 标记的点状结构膨胀成小的环状 结构 ；采用100 μg/mL 布雷菲德菌素A（BFA）处理可使OsRab5b-GFP 标记的结构聚集。大部分的OsRab5b-GFP 信号都可以与前 液泡区标记蛋白VSRAt-1 共定位。在内吞示踪染料FM4-64 摄取的第60 min，OsRab5b-GFP 标记的结构大部分被FM4-64 标记。突变 体OsRab5b（Gly2Ala）-GFP 弥散分布于细胞核和细胞质内，而且不受wortmannin 或BFA 药物处理的影响。OsRab5b 定位于BY-2 细胞的前液泡区，Gly2 在蛋白准确定位方面发挥重要作用。 关键词 ： OsRab5b ；亚细胞定位 ；前液泡区 ；内吞体 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.11.017 Subcellular Localization of Rice Small G Protein OsRab5b in - BY 2 Cells Shao Junli1，2 Long Yuesheng2，3 Xu Zengfu2，4 （1. School of Public Health ，Guangdong Medical College ，Dongguan 523808 ；2. Key Laboratory of Gene Engineering of the Ministry of Education ，School of Life Sciences ，Sun Yat-sen University ，Guangzhou 510275 ；3. Institute of Neuroscience ，The Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University ，Guangzhou 510260 ；4. Key Laboratory of Tropical Plant Resources and Sustainable Use ，Xishuangbanna Tropical Bot