地鳖虫纤溶活性蛋白cDNA序列克隆及毕赤酵母表达.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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地鳖虫纤溶活性蛋白cDNA序列克隆及毕赤酵母表达.pdf

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生物技术通报 ·研究报告 · B IO TECHN OLO G Y　BULL E T IN 2009年第 11期地鳖虫纤溶活性蛋白 cD NA 序列克隆与毕赤酵母表达李兴暖1, 2 韩雅莉3 ( 1九江学院基础医学院 ,九江 332000; 2汕头大学医学院 ,汕头 51504 1; 3广东工业大学轻工化工学院 ,广州 510090 ) ( ) 　　摘　要 : 　依据已报道的地鳖虫成熟肽 cDNA 序列设计引物 ,通过 R TPCR 法从地鳖虫 E up olyp hag e s inens is W alker 中克 ( ) α 隆得到 675 bp 地鳖虫纤溶活性蛋白 fib rinolytic p rotein, EFP 成熟肽编码序列。将此片段克隆到表达载体 p P ICZ A 中 ,转化毕赤酵母 GS115, 甲醇诱导表达得到重组表达蛋白,经 SD SPA GE 电泳和活性鉴定 ,表明重组 EFP在毕赤酵母中均获得表达 , 重组表达蛋白相对分子质量为 282 kD ,表达产物分子质量与理论分子质量相符。重组蛋白在毕赤酵母中以分泌形式表达 , 具有纤溶活性。关键词 : 　地鳖虫纤溶活性蛋白基因 cDNA 克隆毕赤酵母表达 Clon ing and Expression of Eupolyph aga sin en sis W a lker F ibr inolytic Prote in cD NA in P ich ia pastoris 1, 2 3 L i X ingnuan H an Yali 1 2 ( B asica M ed ica l Colleg e, J iuj iang Un iversity, J iuj iang 332000; M ed ica l Colleg e, S han tou Un ivers ity, S han tou 51504 1; 3 B ioeng ineering D ep a rtm en t, Guang dong Un iversity of Technology, Guangzhou 510090 ) 　　Ab s tra c t: 　The p rim ers were designed corresponding to E up olyp hag a s inens is W alker fib rinolytic p rotein ( EFP) cDNA sequence wh ich has been reported.