红罗非鱼Na+-K+-ATPaseα基因的克隆及在不同盐度条件下mRNA表达差异.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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红罗非鱼Na+-K+-ATPaseα基因的克隆及在不同盐度条件下mRNA表达差异.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第期 2014 3 + + 红罗非鱼 Na -K -ATPase α基因的克隆及其在不同盐度条件下 mRNA 表达差异 1，2 1，2 1，2 1，2 1，2 1，2 王忠良张健东黄建盛汤保贵周晖施钢 1，2 3，4 1，2 潘传豪吴灶和陈刚（1. 广东海洋大学水产学院，湛江 524088 ；2. 广东省普通高校南海水产经济动物增养殖重点实验室，湛江 524088 ；3. 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，湛江 524088 ；4. 仲恺农业工程学院，广州 510225） + + 摘要：为获知红罗非鱼（ sp ）Na -K -ATPase α基因的全长分子结构及其在不同盐度条件下的表达情况，采用 Oreochromis . 同源克隆及cDNA 末端快速扩增（RACE-PCR ）方法，首次在红罗非鱼鳃组织中克隆到了全长为3 379 bp 的Na+ + -K -ATPase α基因全长cDNA 序列，该序列包含3 072 bp 的开放阅读框（ORF ），143 bp 的5末端非编码区（UTR ）和164 bp 的3末端非编码区（UTR ），编码 1023 个氨基酸，预测分子量为112.5 kD ，理论等电点为5.26 。BLAST 分析显示红罗非鱼Na+ + -K -ATPase α基因编码的氨基酸序列与其它已知物种相应基因编码的氨基酸序列的同源性达到97%-99% ；系统进化分析显示，红罗非鱼Na+ + -K -ATPase α亚基与萨罗罗非鱼（）和莫桑比克罗非鱼（）亲缘关系较近。应用Real-time PCR 技术，