基因组编辑技术的研究进展.pdfVIP

生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2014 11 基因组编辑技术研究进展 吴璐  王磊  任远  原辉 （深圳华大基因研究院，深圳 518083） 摘 要 ： 利用基因组编辑技术可以对生物基因组特定位点进行人工修饰，研究相关基因的功能，进而应用于基础研究和临 床治疗方面。序列特异性的DNA 结合结构域与非特异性的DNA 修饰结构域组合而成的人工酶是基因组编辑工具的重要组成部分。 主要介绍了锌指核酸酶 （ZFNs）、转录激活样效应因子核酸酶 （TALEN）、归巢核酸内切酶 （Meganucleases）和成簇间隔短回文重 复 （CRISPR）4种基因组编辑技术的特点、原理、构建方法及应用，为相关的研究和应用提供参考。 关键词 ： 基因编辑 ZFNs TALEN CRISPR 同源重组 The Research of Genome Editing Wu Lu Wang Lei Ren Yuan Yuan Hui - （BGI Shenzhen ，Shenzhen 518083 ） Abstract: Genome Editing can be used to operate artificially almost any gene in cells or organisms. This research method of gene function is useful for fundamental research and clinic treatment. The major component of this tool is artificial nuclease with specific DNA-binding domain and non-specific DNA-modifying domain. This article reviews the characteristics, principle, construction and application of ZFN, TALEN and CRISPR/Cas, which would be useful reference for related research. Key words: Gene editing ZFNs TALEN CRISPR Homologous recombination 基因组定点编辑技术，可以实现对一个或多个 修复（Homology directed recombination repair，HDR） 目的基因的敲除，或是把外源基因敲入到指定位点， 和 非 同 源 末 端 连 接（Non-homologous end joining， 也可以利用转录因子在转录水平上对目的基因的表 NHEJ）两种方式修复。在同源序列（外源引入或同 达水平进行调控，这项技术是研究基因功能并对基 源染色体）存在的情况下，同源重组修复（HDR） 因的功能加以利用的最有效手段。 可实现外源基因的插入或基因的靶向修复 ；在没有 基因组定点编辑工具主要有锌指核酸酶（Zinc- 同源序列的情况下，细胞趋向于利用非同源的末端