Fractalkine、IP-10及其不同信号通路抑制剂对肿瘤微环境中NK细胞的影响.pdfVIP

Med J Chin PLA, Vol. 40, No. 7, J uly 1, 2015 　547 论　著 Fr act al k i n e 、I P- 10及不同信号通路抑制剂对肿瘤微环境中 NK细胞的影响 吴朝真，刘放，李宁，张宏瑶，靳凤姣，兰岚，王悦 [摘要]　目的　探讨Fractalkine (FKN) 、干扰素诱导蛋白10 (IP- 10) 以及不同信号通路抑制剂对肿瘤微环境自然杀伤 (NK )细胞数目和功能的影响。方法　免疫组化染色观察人乳腺癌组织中CD 56和DA P 10 的分布情况。通过共培养小鼠 : 巨噬细胞RAW 264 .7 与小鼠乳腺癌细胞4T 1模拟体外肿瘤微环境(数目比例1 4 ) ，以小鼠NK 细胞KY- 1为研究对象。RT- P CR检测肿瘤微环境中KY- 1细胞表面活性受体CD 16 、NKG2D及NK 1. 1的表达；ELI SA 检测培养细胞上清CD 107a 的含 + + 量。在肿瘤微环境中加入10ng/ml FKN及10ng/ml IP- 10 ，流式细胞术测定NK 1. 1 CD 16 KY- 1细胞的数量；趋化及黏附实 验评价其迁移和黏附功能的变化。最后，以10nmol /L雷帕霉素、30 μmol /L LY 294002 、500ng/ μl穿心莲内酯、2 μmol /L 渥曼青霉素分别处理4T 1细胞，收集上清分别孵育RAW 264.7细胞4 8h后，RT-PCR检测4T 1、RAW 264.7 mRNA 及两种混 + 细胞比例、趋化率及黏附功能明显下降，加 合mRNA 中R ae 1 α、H60a 的表达。结果　肿瘤微环境中，KY- 1细胞NK 1. 1 入FKN 和IP- 10后以上各项指标明显增高，不同信号通路阻滞剂使4T 1细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性均有不同程度提 高，以雷帕霉素作用最为明显(P 0.05) 。结论　FKN 、IP- 10可上调肿瘤微环境中NK细胞的数目和功能，雷帕霉素等通 过诱导肿瘤细胞高表达NKG2D配体(R ae 1、H60a) ，间接促进NK细胞的杀伤活性。 [关键词]　趋化因子CX 3CL 1 ；趋化因子CXCL 10 ；信号传导；杀伤细胞，天然；肿瘤微环境 [中图分类号]　R743.3 1　　　　[文献标志码]　A　　　　[文章编号]　0577-7402 (20 15)07-0547-07 [D OI]　10. 11855/j.issn.0577-7402.20 15.07.07 Effect of fractalkine, IP-10 and different signal pathway inhibitors on NK cells in the tumor microenvironment WU Zhao-zhen 1 1 1 1 1 2 1* , LIU Fang , LI Ning , ZHANG Hong-yao , JIN Feng-jiao , LAN Lan , WANG Yue 1Department of Immunology, School of Medicine, Nankai University, Tianjin 300071, China 2Department of Integrated Chinese and Western Medicine, Tianjin Cancer Hospital of Tianjin Medical