MXR1基因对毕赤酵母工程菌代谢调控的影响.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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MXR1基因对毕赤酵母工程菌代谢调控的影响.pdf

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生物技术通报 · · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 8 研究报告年第期 MXR1 基因对毕赤酵母工程菌代谢调控的影响袁围叶燕锐林影 ( ， 510000) 华南理工大学生物科学与工程学院广州 : Mxr1p ， B 摘要为了研究毕赤酵母中转录因子在毕赤酵母代谢调控中所起的作用构建一株以南极假丝酵母脂肪酶 (CALB) ，MXR1 。 pPIC9K-CALB GS115 ，基因作为报告基因基因完全缺失的毕赤酵母基因工程菌株将重组质粒转化毕赤酵母利用三丁酸甘油酯平板筛选得到分泌表达CALB 的重组菌GS115 / pPIC9K-CALB 。通过重叠延伸PCR 方法获得一段中间含有 sh ble ， 1 200 bp MXR1 ，博来霉素抗性基因两翼大约各有与毕赤酵母基因上下游同源的基因片段将此片段用氯化锂法转化 GS115 / pPIC9K-CALB ， CALB MXR1 毕赤酵母细胞后利用博来霉素抗性及酶活力丧失双重筛选的方法得到一株基因完全缺。，、失的毕赤酵母基因工程菌株该菌株在以甲醇为唯一碳源的培养基中不生长在以乙醇葡萄糖或者甘油为唯一碳源的培养。 Mxr1p ，、、基中生长缓慢结果表明转录因子在毕赤酵母中的多条代谢途径中起着关键性的作用主要涉及甲醇乙醇甘油和葡萄糖等代谢途径。 : Mxr1p B 关键词毕赤酵母代谢调控基因敲除转录因子南极假丝酵母脂肪酶 The Effect of MXR1 Gene on Metabolic Regulation in Pichia p astoris Yuan Wei Ye Yanrui Lin Ying (School of Bioscience ＆ Bioengineering ，South China University of Technology ，Guangzhou 510000) Abstract : To investigate the effect of transcriptional factor Mxr1p on metabolism regulation in P． p astoris ，we constructed a recom-