bar基因表达蛋白单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立.pdfVIP

生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2014 10 bar 基因表达蛋白单克隆抗体制备及 ELISA 检测 方法的建立 龙丽坤  李葱葱  张明  李飞武 （吉林省农业科学院，长春 130033） 摘 要 ： 通过原核表达诱导 基因表达蛋白，通过表达蛋白免疫BALB/c 小鼠，经细胞融合、筛选克隆，获得一个杂交瘤 bar 细胞株。以兔多抗作为捕获抗体，鼠单抗作为示踪抗体，辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG 作为检测系统，建立了转基因植物 基 bar 因检测双抗夹心ELISA 方法，试验证明利用该抗体建立的ELISA 检测方法含有转 基因的转基因玉米成分具较好的特异性和灵 bar 敏度。为转基因成分的检测提供了安全、快速、准确的技术手段。 关键词 ： bar 基因 杂交瘤细胞 单克隆抗体 转基因检测 Development of A Monoclonal Antibody Sandwich ELISA for Detection of bar Gene Transgenic Plant and Element Long Likun Li Congcong Zhang Ming Li Feiwu （Jilin Academy of Agricultural Sciences ，Changchun 130033 ） Abstract: This study induced prokaryotic express Bar protein, by protein Immunity of BALB/c mice, cell fusion and screening clones, we obtained a hybridoma cell line. In this study, using rabbit polyclonal IgG and hybridoma cells secreting monoclonal antibodies we established sandwich ELISA method for detection of bar gene intransgenic plant which showed good specificity and sensitivity . This study provides rapid and accurate.technical tool for a secure monitoring of GMO. Key words: bar gene Hybridoma Monoclonal antibody GMO detection 随着转基因技术的不断发展，人们对于转基因 对 Cry1Ab、Cry1Ac 等 Bt 蛋 白，CP4-EPSPS 蛋 白， 生物及其产品的安全性的关注度越来越高，为此， 磷酸酶 II 等蛋白的检测方法已广泛应用 ［2］ 。bar 基 包括我国在内的 50 多个国家和地区建立了标识制