百合属ISSR反应条件优化的研究.pdfVIP

中圊摩琴c亟提 2013，29(04)：118—122 Chinese ScienceBulletin Agricultural 百合属ISSR反应条件优化的研究 陈名红1一，李玉1，刘多1，熊华斌1，李成云2 (1云南民族大学民族药资源化学国家民委．教育部重点实验室，昆明650031； 2云南农业大学农业生物多样性与病虫害控制教育部重点实验室，昆明650201) 摘要：建立一个稳定性高、重现性好，适合百合ISSR遗传差异分析的PCR反应体系。设定反应体系中 各因子的不同浓度并进行PCR扩增，依据稳定性高、重现性好的原则，对该反应体系进行调整与优化， 最终建立稳定可靠的ISSR反应体系。适于百合ISSR．PCR反应的最佳体系(25灿)为：40ng模板DNA， 2．0mmol／L U I．tmol／L引物，200Ⅲnol／LdNTPs；扩增程序为：94℃预变性5 M92+，1．5TaqDNA聚合酶，0．8 min，51．8℃退火1rain，720C延伸2min，共