甘蔗蔗糖转运蛋白ShSUT4基因的克隆及和糖份积累间的关系.pdfVIP

甘蔗蔗糖转运蛋白shsuT4基因的克隆及其与糖份积累问的关系 内容提要 甘蔗是一种重要的糖料作物，同时也是一种高光效的C4植物，其成熟茎节中 积累高浓度蔗糖的机制已经成为了研究的热点。蔗糖是甘蔗从源到库转运过程中的 主要形式，蔗糖的转运一是通过共质体途径，即通过胞间连丝在细胞间进行转运； 二是通过质外体途径，即穿过细胞壁和组织间的细胞间隙进行转运。转运方式的不 同主要取决于组织类型和发育时期。蔗糖在质外体和共质体间的转运需要质膜上的 蔗糖转运蛋白介导。因此，分离克隆甘蔗中蔗糖转运蛋白基因肋SUⅣ，进一步鉴 定转运蛋白的功能，可为阐明甘蔗蔗糖的运输和积累机制提供理论依据，另外还可 为培育高蔗糖含量的甘蔗新品种提供理论基础。 本实验通过R．T-PCR和RACE技术获得了甘蔗蔗糖转运蛋白基因繇S阴■。序 列分析显示．淞叼彳，1867bp，具有完整的编码阅读框，编码区为47．1555bp，共编 码501个氨基酸，并具有典型的12次跨膜结构的特征。ShSUT4与玉米的蔗糖转运 蛋白SUT4同源性达95％。 为内参基因，对甘蔗蔗糖转运蛋白基因ShSUT4进行初步ImPCR表达分析。结果 显示ShSUT4基因几乎在所有检测的组织中都表达，在叶中表达最强，根中最弱。 为了进一步揭示分离克隆到的基因与甘蔗蔗糖转运与积累的关系，本文先采用 DNS法对成熟甘蔗体内糖份积累的规律进行了测定，DNS测定结果显示：成熟甘 蔗1．3节糖份较低、4．9节糖份快速积累、13．15节达到最大值后逐渐趋向平稳；再 以不同茎节的RNA作为模板进行|S掰们￥RT-PCR表达测定，并分析了黝。S研￥ 蔗1．3节表达最低、5．6节最高、16．17和20．21节表达量趋向平稳。说明册们￥ 的表达量与甘蔗糖份积累呈正相关。 又对不同含糖量的甘蔗品种的成熟茎节进行．沁W≯RT-PCR表达分析，结果表 明，ShSUT4表达量也与甘蔗品种的糖含量呈正相关。 综合上述所有结果分析，初步推断出ShSUT4与甘蔗蔗糖转运与积累过程密切 相关。这些研究成果为进一步深入研究甘蔗蔗糖积累的机制奠定了良好的基础。 关键词：甘蔗蔗糖转运蛋白基因克隆RT-PCR糖含量测定 Abstract a efjfbctiVe C4 isan crop，andlligh photosynthesis SugarcaneimpoIrtantsugar 0fsucrose of coneentrationsbysugarcane aCcurnulation Species．The phenomenal beent11efocusofintellse isthe (．铴cc厅口rzfmD历c办缎，“聊L．)has study．Sucrosem旬or source t0slnk translocatedin orgaJls carbon tmsport行om cornpo伽【d su朗∽ane．During followa ceUtocell、，ia either syⅡ1plaLsmicpa也way，moVing仃om organS，sucrose of