实验一显微摄影技术摘要.ppt

实验一 光学显微镜使用及显微摄影技术 （1）取、放显微镜的正确做法　 一手握镜臂，一手托镜座，托在胸前。小心轻放，避免震动。放在距离桌边5-10cm左右为好。 （2）对光　 先将低倍物镜对准通光孔，调整反光镜（外光源显微镜）或电源电压（内光源显微镜），使视野中的光线明亮而不刺眼。也可以改变孔径光圈或改变聚光器的位置达到改变照明的目的，但反光镜一定要调到最佳的角度。 （3）放置标本 将标本放在载物台上，固定好。将玻片中有标本的地方移到通光孔的中央。如果位置不是在中央，因为物镜的观察范围有限，有可能观察不到所要看到的内容。 （4）调整焦距 眼睛不要看目镜，要从侧面注视低倍镜与标本。慢慢转动粗准焦距螺旋，使物镜与玻片标本接近。待目测低倍镜与标本盖玻片之间的距离比低倍物镜的工作距离（7.63mm）小一些时，即可注视目镜，并向相反的方向调节粗准焦螺旋，使物镜与标本的距离增大，慢慢会看到视野中物像的出现。注意这一操作如果违章有可能会损坏仪器或标本！ （5）使用低倍镜观察　 移动标本，找到要观察的位置。用细准焦螺旋调清物像。 （6）使用高倍镜观察　 将需观察的位置移到显微镜视野的中央，将高倍镜换入即可。使用高倍镜前一定要用低倍镜进行观察。不可直接用高倍镜。 （7）使用油镜观察 在观察细小结构时需要使用100倍的物镜。100倍的物镜需要在油的介质中工作，故称油镜或油浸物镜。油镜需在物镜与标本之间充上一种折光率与玻璃一样高的介质，通常使用香柏油，才能使物像清晰。方法是先低倍，后高倍，再用油镜。 （8）显微镜用后 应先转动物镜转换器，将高倍物镜或油镜旋出通光孔的上方，再取下玻片标本。一定要及时清除油镜上的油。将反光镜放在竖直的位置，以减少落上灰尘。保持清洁，罩好防尘罩。 （1）看清楚 把正常的、一般的结构与偶然的、人为的一些结构区分开，然后选择那些有代表性的典型的部位进行绘图。 （2）定位置 先确定要画的图在实验报告纸上的位置和大小，力求布局合理、美观，不能任意的无计划的画图，否则位置不适当或偏在一角、或过大过小，影响注字和说明。考虑在左侧一边留一定边缘，以备装订之用。 （3）定大小 一般尽可能的把图画大些。如果是细胞图，为了清楚表明细胞内部结构，所画细胞不宜过多，1～2个即可，但每个细胞的各个部分按同比例适当放大，如画轮廓图或图解图，也不一定把全部切面（如根茎的横切面图）画出，根据需要画出1/2～1/8即可。 （4）求真实 须注意其科学性，精确性，不能任意臆造，加以美化，绘图力求准确。先用HB铅笔起草，后用硬铅笔画出。 （5）用点线 图只用点和线表示。生物绘图法中除了轮廓线以外，其余表现物体立体感、大小、厚度、形态的唯一形式是打点，即使用HB铅笔打点来表现光线明暗。切不可涂黑，细胞壁用平行的双线表示，线条要细而圆滑，粗细均匀，原生质体内的结构（如细胞质、细胞核等）要用疏密的点表示，点要细圆，不拖尾巴。细胞与其他细胞相连接处要画出一些来，以表示所画的细胞不是孤立的。 （6）勤对照 与显微镜下实物对照，检查一下是否有无遗漏或错误. （7）做注释 用直线从各部分引出并注出名称。字最好在图右侧，字要端正、大小一致、排列整齐。每个图的下方注明图的名称及所用材料，例如“洋葱表皮细胞”、“小麦颖果纵切”等。 （1）形态结构要准确，比例要正确，要求真实感，立体感，精美而美观。图中较暗部分用点表示,用点的稀疏稠密表示黑暗程度，不能使用横线或者涂黑。 （2）图面要力求整洁，铅笔要保持尖锐，尽量少用橡皮。 （3）绘图大小要适宜，位置略偏左，右边留着注图。 （4）绘图的线条要光滑、匀称，点点要大小一致。 （5）绘图要完善，字体用正楷，大小要均匀，不能潦草。注图线用直尺画出，间隔要均匀，且一般多向右边引出，图注部分接近时可用折线，但注图线之间不能交叉，图注要尽量排列整齐。 （6）绘图完成后在绘图纸上方要写明实验名称、班级、姓名、时间，在图的下方注明图名及放大倍数。 * * 一、实验目的 1、了解光学显微镜结构原理并熟练掌握其操作方法； 2、掌握显微摄影技术操作流程，了解传统摄影技术中照片洗印操作流程； 3、了解暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜、微分干涉差显微镜、倒置显微镜、等的构造和使用方法。 二、实验原理 显微镜的放大效能是由其照明系统所使用光的波长和透镜系统的数值孔径决定，缩短使用的光波长或增加数值孔径可以提高分辨率。 可见光的光波振幅较窄，因此使用较短波长的紫外光作为光源系统，可以提高分辨率。而对于一台普通光学显微镜，一般来说，提高其分辨率主要通过提高数值孔径（选用镜口角大的透镜，提高介质折射率）。 基础知识 显微镜概述： 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光