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3.3.6 工业微生物培养基 工业微生物培养基要满足“经济、高效”的原则,同时还要满足以下要求: 从单位质量基质中获得产物最大收获量; 在发酵醪中获得产物的最大浓度; 可达到产物形成的最大速率; 副产品的收获量最少; 培养基原料便宜、质量稳定、全年可稳定供应; 生产过程中,通气/搅拌、萃取或提取、产品纯化、废物废液处理等方面的问题最少; 考虑培养基可能会影响pH变化、泡沫形成、电势改变以及菌种形态和变异等问题。 运送机制:是依靠磷酸转移酶系统,即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统. 运送步骤: (1)热稳载体蛋白(HPr)的激活 细胞内高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的磷酸基团把HPr激活。 酶1 PEP+HPr 丙酮酸+P-HPr HPr是一种低分子量的可溶性蛋白,结合在细胞膜上,具有高能磷酸载体的作用。 (2) 糖被磷酸化后运入膜内 膜外环境中的糖先与外膜表面的酶2结合,再被转运到内膜表面。这时,糖被P-HPr上的磷酸激活,并通过酶2的作用将糖-磷酸释放到细胞内。 酶2 P-HPr+糖 糖-P +HPr 酶2是一种结合于细胞膜上的蛋白,它对底物具有特异性选择作用,因此细胞膜上可诱导出一系列与底物分子相应的酶2。 基团移位模式图 细胞膜外 细胞膜内 S S S S 细胞膜 Enz2 Enz2 Enz2 Enz2 S S HPr P ~ P HPr ~ Enz1+ PEP 丙酮酸 四种运输营养物质方式的比较 有 快 由稀至浓 胞内浓度高 特异性 需要 改变 有 快 由稀至浓 胞内浓度高 特异性 需要 不变 有 快 由浓至稀 相等 特异性 不需要 不变 无 慢 由浓至稀 相等 无特异性 不需要 不变 特异载体蛋白 运输速度 物质运输方向 胞内外浓度 运输分子 能量消耗 运输后物质的结构 基团转位 主动运输 促进扩散 单纯扩散 比较项目 膜泡运输主要存在于原生动物中,特别是变形虫(amoeba), 为这类微生物的一种营养物质的运输方式)。 4.4 膜泡运输(Memberane Vesicle Transport) Special Cases 1.???? Endocytosis 2.???? Exocytosis * 细菌培养基—营养肉汤(nutrient broth): 牛肉膏 3g;蛋白胨 5g ;水 1000ml;pH 7.2~7.4 放线菌培养基——高氏1号: 可溶性淀粉 20g; KNO3 1g; K2HPO4 1g MgSO4 0.5g NaCl 1g; FeSO4?7H2O 0.5g 水 1000ml; pH 7.2~7.4 霉菌培养基——查氏(zapek)培养基: 蔗糖 30g; KCl 0.5g; MgSO4.H2O 0.5g; FeSO4 0.5g 水 1000ml; K2HPO4 1g; NaNO3 3g; pH 6.7 酵母菌培养基——麦芽汁培养基 3.3.1 根据所培微生物类群来分 ①细菌培养基 ②放线菌培养基 ③霉菌培养基 3.3 培养基的类型及应用 例:味精生产菌北京棒状杆菌AS1299的一级种子(用摇床培养)培养基配方: 葡萄糖 3% 玉米浆 2.5~3.5% 尿素 0.3~0.5% K2HPO4 0.1~0.2% MgSO4 0.05% 二级种子(1200升发酵罐)培养基配方:以水解糖3%代替葡萄糖3%,其他成分相同。 3.3.2 根据培养目的来分 ① 种子培养基(seed culture medium)—是为保证发酵生产获得大量优质种子而设计的培养基,有时为使菌种能迅速适应后面的发酵条件,还有意识地加
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