内质网分子伴侣和小鼠脑发育的关系.pdfVIP

中文摘要 目 的 胚胎时期是多细胞生物个体发育过程中的一个重要阶段，这一时期的 胚胎易受外界不利环境因素的影响。应激反应是生物体对抗外界不利环境 因素的一种重要的保护性反应，在这个反应过程中细胞内产生大量的热休 ShockProteins 克蛋白(Heat HSPs)，它们具有抵御损伤，保护细胞的作用。 研究表明，即使在非应激状态下，细胞内仍有HSPs的表达，因此有关热休 Loones，SandraM．Dsouza分别研究了热休克蛋白在小鼠胚胎期和出生后的 神经系统发育过程中的分布情况，推测HSPs在神经发育过程中可能与神 经细胞的分化、迁移以及神经细胞内的信号转导和蛋白质的运输有关。 GRP78、 葡萄糖调节蛋白78、94(Glucose—regulated protein78、94 Reticulum ER)腔内的分子伴侣， 同时他们又是分布在内质网(Endoplasmic 具有弱的ATP酶活性，与ATP结合后可以协助新生蛋白质的转位、折叠以 及寡聚蛋白的组装。多细胞生物体发育的实质是基因的选择表达性．表达 蛋白的成熟则有赖于分子伴侣的协助。有研究表明GRP78在生物体发育 过程出现在受精卵两个细胞阶段，并且在胚泡中已有较高的表达水平。近 脑发育过程中的作用迄今尚不清楚。本文从神经发育的角度研究了内质网 GRP78、GRP94在此过程中的生物学意义。 方 法 mRNA表达情况 mRNA 表达情况 ·】· 胚胎脑组织不同部位GRP78、GRP94蛋白表达情况。 脑组织中的表达和定位分布情况。 NA及蛋白质表达情况。 结 果 1．小鼠脑发育过程中分子伴侣GRP78、G舳194的表达呈现出时间顺序 性，而且二者的表达模式不同：GRP78胚胎早期表达较高，胚胎发育宋期逐 渐下降，出生后逐渐升高，至生后一周时达到成年鼠的水平，而GRP94在发 育的早期表达水平较低，发育中期逐渐升高，出生时达到高峰，出生后一直 维持在较高的水平。这表明分子伴侣GRP78、GRI丐4在发育过程中具有不 同的作用，而且在同一发育时期里，其表达水平的差异性提示了在生物体内 存在某种机制来调节在特定发育时期里不同分子伴侣的表达。 2．小鼠脑发育过程中GRP78、GRP94在空间上的表达模式也不相同。 在小鼠脑发育过程中GRP78的表达呈现出空间差异性，呈现出一种空间上 的浓度梯度分布：从端脑到后脑其蛋白和mRNA的表达水平逐渐降低，而 GRP94的表达不表现这种差异性，在不同脑组织区域中无明显变化。这说 明GRP78可能是脑发育过程中的一个位置信息因子，参与了脑发育早期的 形态建立过程。同时也说明在发育过程中，GRP78、GRP94在不同区域脑组 织内发挥的作用也不尽相同。 mRNA和蛋白的表达水平 3．在小鼠发育的整个过程中GRP78、GR_P94 始终成正相相关，说明二者的表达调控发生在转录水平，而GRP78、GRP94 表达模式的不同则说明在小鼠脑发育过程中存在不同的信号通路来调控二 者的表达。 4．形态学研究的结果发现在小鼠脑发育的整个过程中，GRP78与 GRI矽4的蛋白分布基本相同，主要在大的神经细胞的细胞质中，并且在神 经细胞内出现的时间明显早于神经胶质细胞。神经细胞的分布情况符合 中枢神经系统发生于干细胞的观点，即神经元和神经胶质细胞来源于共同