川芎嗪对肾间质纤维化模型大鼠Smad7和SnoN蛋白表达的影响.pdfVIP

第34 卷第1 期 Vol. 34，Issue 1 2009 年1 月 January，2009 川芎嗪对肾间质纤维化模型大鼠Smad7 和 SnoN 蛋白表达的影响 * 陆 敏，周 娟，王 飞，刘煜敏，张 悦 （上海中医药大学 科技实验 心，上海 201203 ） [摘要] 目的：探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine，TMP)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)所致大鼠肾 间质纤维化的作用及机制。方法：雄性SD 大鼠18 只，随机分为3 组：假手术组、模型组以及TMP 组，每组6 只。采用单 侧输尿管结扎建立大鼠肾间质纤维化模型。川芎嗪(40 mg·kg-1·d-1)治疗3 周后取梗阻侧肾组织，分别进行HE 和Masson 染色， 观察肾组织病理改变和胶原沉积的变化；采用放射免疫分析法检测III 型前胶原含量；应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测肾组 织中转化生长因子-β 1(transforming growth factor-β 1，TGF-β 1)水平；采用Western blotting 检测肾组织中Smad7 和Smad 转录 共抑制因子SnoN 蛋白表达水平的变化。结果：与假手术组比较，镜下可见模型组大鼠肾小管萎缩，管腔扩张，肾间质中大 量胶原纤维沉积，肾间质明显增宽；III 型前胶原、TGF-β 1 含量显著增加；Smad7，SnoN 蛋白表达水平显著下调。TMP 组 与模型组比较，肾组织病理改变明显改善，III 型前胶原、TGF-β 1 含量明显降低，Smad7，SnoN 蛋白表达水平明显上调。结 论：川芎嗪具有显著抗肾间质纤维化的作用，其机制与降低肾组织中促纤维化细胞因子TGF-β 1 含量，同时恢复Smad 逆向 调控因子Smad7 和SnoN 蛋白表达水平有关。 [关键词] 川芎嗪；单侧输尿管梗阻；肾间质纤维化；Smad7；SnoN 12肾间质纤维化是临床各种肾脏疾病后期的共 临床与药理试验均显示川芎嗪具有良好的抗纤维 [2-3] 同病理表现之一，是影响肾功能衰竭进程的重要环 化作用 ，然而对于其作用机制尚未进行深入研 节，积极防治肾间质纤维化，对慢性肾脏疾病的转 究。本实验应用川芎嗪对 UUO 所致肾间质纤维化 归具有重要意义。因此，肾间质纤维化发病机制及 大鼠进行干预，观察其对肾间质纤维化的影响，并 其防治措施的研究已成为近年来国际肾脏病学研 以TGF-β 1 的逆向调控因子为靶点，初步探讨其作 究的热点之一。目前，肾间质纤维化的发病机制尚 用机制。 未完全阐明，已有的研究表明，各种致纤维化的细 1 材料 胞因子和生长因子在其中具有重要作用，而 1.1 药物 TGF-β 1 是目前公认且已知作用最强的促纤维化因 盐酸川芎嗪注射液(TMP,上海现代哈森药业有 子。随着研究的不断深入，人们发现，TGF-β 1 的 限公司,批号，用生理盐水配制成4 g·L-1 。 活性受到多个水平调控机制的紧密调控，其中抑制 1.2 动物 型Smad，Smad7 以及Smad 转录共抑制因子SnoN 雄性SD 大鼠18 只，SPF 级，体重(170±10) g， 是其在自身细胞内的2 个重要的逆向调控因子，对 由中国科学院上海实验动物中心提供，合格证号 [1] SCXK(沪)2002-0002 。 TGF-β 1 起到负反馈调节作用 。 川芎嗪是从