肾间质纤维化中IGF-1基质降解酶关系的实验的研究.pdfVIP

上海第二医科大学硕士研究生论文 肾间质纤维化中IGF一1与基质降耄萼代码I鬻 解酶关系的实验研究 中文摘要 现有的研究表明，肾间质纤维化的主要病理特征是肾间质成 lular 纤维细胞的大量增殖以及细胞外基质(Extracelmatrix， ECM)在肾间质的过度沉积。而造成ECM大量沉积的直接原因， 则是肾间质中的ECM合成增加和降解减少的综合结果。成纤维 细胞是间质中产生ECM的主要细胞。肾间质成纤维细胞增殖和 ECM在肾间质的过度沉积的发生机理是各种原因引起的肾间质 细胞与各种细胞因子相互作用的结果。目前国内外对类胰岛素 in一1ike 样生长因子一1(insul growth 质降解之间的关系研究得较少，故本实验选择IGF一1作为实验 的刺激因子，来研究人的成纤维细胞中IGF一1与基质金属蛋白 酶(MMP)一2之间的关系。 一弋本实验用原代细胞培养法培养人的肾问质成纤维细胞，予不 同浓度的IGF一1(0、5、10、50 ng／m1)分别作用24、48、72 MMP一2 35．97± mRNA的量一过性增高，与对照组相比可达1 18．07％(P0．01)；人成纤维细胞表达TIMP-1 mRNA的量一过性 3±1 增高，与对照组相比可达121．20．63％(Po．01)。说明小剂 上海第二医科大学硬±磺究生论文 mRNA的表达量反应性增加，并 量的IGF一1在短时间可使MMP-2 可能会刺激TIMP—i的分泌增多。在IGF—i作用时间为48h时， mRNA的表达量 浓度为5ng／ml的IGF—I使人成纤维细胞MMP一2 09．84土5．34％(PO．05)，说 由i35．97士18．07％(PO．01)降至i 明小剂量的IGF—i随着其作用时间的延长，能使原先一过性增 mRNA的量为对照组的 高的MMP一2mRNA的量回复；此时TIMP-1 4- 细胞M／rIP-2mRNA的表达仍较对照组为低，分别为89，37 间达到72h时，嘲P一2mRNA的表达量呈现出递减的趋势，且呈 mRNA量 浓度依赖性下降，而此时不同浓度的IGF—I对TIMP-1 mRNA 的影响并不大，似乎IGF-I与人成纤维细胞表达TIMP-1 的量之间并无十分密切的联系。而当IGF-I持续作用48和72h 时，删P一2／TIMP—i的比值总体上可呈递减趋势。尤其是当IGF- l浓度为10ng／ml时，瑚P一2／TIMP一1比值的下降更为明显。 活性较对照组有所增高，为对照组的106．85土4．02％，说明在 短时间内小剂量的IGF-I可使ANP一2的活性一过性增高；当浓 2．55％(Po．01)；而-3浓度达到5 0ng／ml时，则使NdP一2的活