N-乙酰基转移酶2多态性和大肠癌发生率关系研析.pdf

中文摘要 N．乙酰基转移酶2多态性与大肠癌发生率关系的研究 摘 要 受关注的代谢酶之一，它催化乙酰基团从乙酰辅酶A(乙酰CoA)转移 到杂环胺类物质的乙酰化过程，在一些药物代谢以及致癌物质的灭活或活 化过程中起着重要的作用。NAT2作为生物转化的第二相酶，其活性直接 影响致癌物质在体内的代谢和毒性反应的强弱。NAT2具有多态性，由于 不同酶切位点的突变，产生M1，M2，M3，M4等位基因，没有突变的野 生型等位基因为wT。多态性的NAT2等位基因构成了多态性的基因型 型的乙酰化表型也呈多态性(快速型和慢速型)。任何两种突变型等位基 因所组成的基因型(Mxl／Mx2)都表现为慢速乙酰化表型；基因型为 表型和等位基因分布在不同的民族和地域之间具有显著性差异。流行病学 调查结果表明，NAT2乙酰化作用的多态性与人体不同部位发生癌变的危 险性有关。大肠癌是河北省常见的肿瘤之～。大肠癌的发生除生活行为及 环境因素外，机体内在的遗传因素日益受到重视。虽然NAT2的快速乙酰 化作用～般被认为是大肠癌发病的危险因素。但是美国研究发现，NAT2 常人之间的分布并无差异。河北汉族人群中，NAT2表型和等位基因在正 常组织、大肠癌组织分布、表达及活性如何未见报道。因此，本研究通过 对河北省汉族正常人群NAT2基因分布多态性进行分析，以及对河北汉族 人群中大肠癌患者的NAT2基因型进行对照研究，探讨大肠癌NAT2的易 感基因或保护因素；并检测不同NAT2基因型患者大肠组织中的mRNA 表达、NAT2酶的活性。对N．乙酰基转移酶2的基因型、表型与大肠癌发 生率的关系进行研究，揭示大肠癌发病的遗传因素，为大肠癌的预防、早 期诊断和治疗提供实验依据。 1河北省汉族正常人群NAT2基因多态性分析 中文摘要 证实不同的SNPs影响NAT2酶的表达、稳定性及催化活性。其中编码区 位置的识别点的突变产生的等位基因叫M2：857nt是BamHl酶识别点， 变的NAT2基因为野生型wT。为获得河北汉族人群NAT2基因遗传资料， 本研究从生活在河北10年以上的河北籍健康人群中随机抽取237份外周 u 方法分析NAT2基因多态性。PCR反应体系为40l，基因组DNA为 25mM，IxPCR缓冲液， 50-200ng，引物20mM，dNTP1．25raM，MgCl2 l 72℃1．5分钟循环35次，72。C延伸5分钟。扩增后，分别取15uPCR产 allele)、 allele)、BamHl酶(M3 物以Kpnl酶(M1allele)、Taql酶(M2 Mspl／Alul酶(M4 和4％(M2，M4)的琼脂糖凝胶中电泳1．3小时，用凝胶成像分析系统 拍照分析。 结果显示如下： 1．1调查的237例河北健康汉族人群中发现4种NAT2等位基因，包括野 中文摘要 2=7．2533，自由度u=8，0．75P0．5)，结果可信。 (z 上述结果提示： 1．1在河北省汉族正常人群NAT2的等位基因中，以M3为主，主要以 WT／M3形式存在，M1等位基因最少，未发现M4等位基因。 2 NAT2基因多态性与河北省汉族人大肠癌的相关性 为了解河北汉族人群NAT2基因分布多态性与大肠癌易感性的关系， 后病理确诊的祖籍河北省并长期在河北省居住的汉族大肠癌患者(年龄 民族、同职业、年龄相差5岁之内、祖籍河北省并在河北省生活10年以 无关个体。 按照PEL·FREEZ试剂盒操作说明从实验对象外周血细胞中提取 物酶切分析条件如前一部分， 结果显示： 2．1河北健康汉族人群和大肠癌患者中存有相同的4种NAT2等位基 群中野生型等位基因WT 85个，突变等位基因中，以M3为主(43个)，