大豆磷脂微生物限度检查法验证重点分析.docVIP

验证文件 大豆磷脂微生物限度检测方法验证 起 草 人 起草日期 审 核 人 审核日期 批 准 人 批准日期 文件编号 目 录 1适用范围 - 1 - 2目的 - 1 - 3概述 - 1 - 4验证所需要的仪器设备及文件 - 1 - 5可接受的限度范围标准 - 2 - 6测试方法 - 5 - 7异常情况处理 - 15 - 8测试结果 - 16 - 9结论 - 16 - 10再验证周期 - 16 - 11附表 - 16 - 1适用范围 本验证方案适用于大豆磷脂微生物限度检查法的验证。 2目的 建立该产品的微生物限度检查方法，并对其有效性进行评价，确保试验方法的完整性，保证检验结果的可靠性。 3概述 3.1按《中国药典》2010年版附录Ⅺ J《微生物限度检查法方法》的“供试品的制备”项下制备方法2（固体、半固体或黏稠液供试品，取供试品10g，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，用匀浆仪或其他适宜的方法，混匀,作为供试液。必要时加适量的无菌聚山梨酯80，并置水浴中适当加温使供试品分散均匀）制备。 按“细菌，霉菌，酵母菌计数”项下检查法1平皿法进行细菌，霉菌及酵母菌的计数方法验证。按控制菌的检查法进行控制菌检查法验证。验证试验使用一批产品进行三次独立平行试验。 3.2验证时间： 年 月 日 到 年 月 日 3.3验证产品批号： 4验证所需要的仪器设备及文件 4.1验证需用仪器设备 器具名称 规格型号 检定日期 检定单位 有效期 霉菌培养箱 SHH-150JS 年 月 日 年 生化培养箱 SHH-150L 年 月 日 年 手提式压力蒸汽灭菌器 XFS-280A 年 月 日 年 4.2验证所需要的文件及存放地方 资料名称 存放地点 《SHH-150JS霉菌培养箱操作维护保养SOP》 《SHH-150L 生化培养箱操作维护保养SOP》 《XFS-280A 手提式压力蒸汽灭菌器操作维护保养SOP》 《微生物限度检查法SOP》 5可接受的限度范围标准 5.1大豆磷脂微生物限度检查质量标准 项目 标准规定 细菌总数 ≤100个/g 霉菌、酵母菌 ≤100个/g 大肠埃希菌 不得检出 沙门菌 不得检出 铜绿假单胞菌 不得检出 金黄色葡萄球菌 不得检出 5.2细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证结果判断 在3次独立的平行试验中，稀释剂对照组的菌回收率应不低于70%。若试验组的菌回收率均不低于70%，照该供试液制备方法和计数法测定供试品的细菌、霉菌及酵母菌；若任一次试验中实验组的菌回收率低于70%，应采用其他方法消除供试品的抑菌活性，并重新进行方法验证。 5.3控制菌检查方法验证结果判断 若试验组检出试验菌，按此供试液制备法和控制菌检查法进行供试品的该控制菌检查；若试验组未检出试验菌，应采用其他方法消除供试品的抑菌活性，并重新进行验证。 5.4大肠埃希菌检查结果判断 如MUG阳性、靛基质阳性，判供试品检出大肠埃希菌；如MUG阴性、靛基质阴性，判供试品未检出大肠埃希菌；如MUG阳性、靛基质阴性，或MUG阴性、靛基质阳性，则应取胆盐乳糖培养基的培养物划线接种于曙红亚甲蓝琼脂或麦康凯琼脂培养基的平板上，培养18～24h。 若平板上无菌落生长、或生长的菌落与下表所列的菌落形态特征不符，判定供试品未检出大肠埃希菌。若平板上生长的菌落与下表所列的菌落形态特征相符或疑似，应进行分离、纯化、染色镜检和适宜的生化试验，确认是否为大肠埃希菌。 培养基 大肠埃希菌落形态 曙红亚甲蓝琼脂 紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色，菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心，圆形，稍凸起，边缘整齐，表面光滑，湿润，常有金属光泽 麦康凯琼脂 鲜桃红色或微红色，菌落中心呈深桃红色，圆形，扁平，边缘整齐，表面光滑，湿润 当阴性对照试验呈阴性，阳性对照试验M U G 呈阳性，供试品M U G 阳性、靛基质阳性，报告lg或l m l供试品检出大肠埃希菌。M U G 阴性、靛基质阴性，报告lg或l m l供试品未检出大肠埃希菌。 M U G 阳性、靛基质阴性、I M V i C试验为一+ ——、革兰阴性杆菌，报告lg或l m l供试品检出大肠埃希菌;M U G 阴性、靛基质阳性、I M V i C试验为+ + — —、革兰阴性杆菌，报告l g或l m l供试品检出大肠埃希菌。 供试品培养物检查不符合二项中的任一项，报告l g或l m l供试品未检出大肠埃希菌。 当阴性对照