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菌落总数测定 检验程序 固体样品称量 用镊子取酒精棉擦手,点燃酒精灯; 打开稀释瓶盖,放在天平上,等显示屏上的数字稳定后,按“去皮”键,当数字显示为“0”时,开始称量。 取(带上试管架): 装有0.85%灭菌生理盐水的锥形瓶1个 装有9mL 0.85%灭菌生理盐水的试管3支(注:液体样品只需2支) 从培养皿筒中取出培养皿。 在培养皿上编号 提示:培养皿上的标记为稀释倍数。 操作前,用镊子取酒精棉消毒桌子、消毒手。 用量筒量取225mL0.85%灭菌生理盐水至稀释瓶中。(注意:稀释瓶、带塞锥形瓶开盖前要过火,量筒、装有0.85%灭菌生理盐水的锥形瓶及其塞子应放在酒精灯周围15cm的范围内) 在培养皿中加入平板计数琼脂培养基(15~20mL),轻摇培养皿,使试样与培养基混匀。 待培养基凝固后,将培养皿放入恒温培养箱。 提示:培养皿放入培养箱时要倒置。 注意选择设置为36℃±1℃的培养箱。 填写答题卷 实验记录 关于实测结果的填写 若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内(30~300),计算两个平板菌落数的平均值,再将平均值乘以相应的稀释倍数,作为每克(毫升)中菌落总数结果。 若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时,按下式计算: 其中: N:样品中菌落数; ∑C:平板(含适宜范围菌落数的平板)菌落数之和; n1:第一个适宜稀释度平板的个数; n2:第二个适宜稀释度平板的个数; d:稀释因子(第一稀释度) 注意: 答题卷上不能出现姓名; 答题卷上不能使用修改液,若需修改,在错字上划二横线,将修改的内容写上,在傍边签上准考证号; 答题卷上的空白处不要出现3个或3个以上。 无菌操作 开盖前要过火,部位为盖子和器皿的接缝处。 关盖之前,盖子和器皿口要分别过火 吸量管在第二次使用前需过火。 整个操作应在以酒精灯为中心,半径为15cm的范围内。 小 结 本次检验操作共取: 装有0.85%灭菌生理盐水的锥形瓶1只,装有9mL灭菌生理盐水的试管3支(液体样品取2支)。 本次检验操作共用: 固体样品:1mL吸量管4支 液体样品:25mL移液管1支, 1mL吸量管4支 * * 检 样 25g(mL)样品+225mL稀释液,均质 10倍系列稀释 选择2个~3个适宜样品匀液, 各取1mL分别加入无菌培养皿内 每个培养皿中加入15~20mL 平板计数培养基,混匀 36℃±1℃ 48h±2h 计算各平板菌落数 计算菌落总数 报告 检 样 固体样品:在电子天平上称取25g + 225mL0.85%灭菌生理 盐水 液体样品:直接取用 固体样品存放罐 去皮键 培养皿筒 取出 培养皿 固体样品:稀释倍数为10-1、10-2、10-3 液体样品:稀释倍数为100、10-1、10-2 -1 -1 -2 -2 -3 -3 空白 空白 0 0 -1 -1 -2 -2 空白 空白 25g+225mL生理盐水 10-1 -1 -1 -2 -2 -1 -3 -3 空白 空白 10-2 10-3 灭菌生理盐水 固体样品 1mL 1mL 1mL 1mL 1mL 25mL+225mL生理盐水 0 0 -1 -1 -1 -2 -2 空白 空白 10-2 灭菌生理盐水 液体样品 液 体 样 品 25mL 1mL 1mL 1mL 1mL 10-1 提示:倒培养基时,培养皿的开口尽量要小;同时,开口对着酒精灯。 提示:摇动培养皿时,切勿使培养基溅到培养皿盖上。 No.xx,有效期:x年x月x日 No.xx,有效期:x年x月x日 No.xx,有效期:x年x月x日 电子天平 恒温水浴锅 恒温培养箱 0.85%灭菌生理盐水 平板计数琼脂培养基 设备编号及计量状态 选用设备、培养基、试剂 选用设备 注意: 设备编号及计量状态填写应与选用设备相对应。 设备编号及计量状态应按实际情况填写,内容为设备上的绿色合格证。 见黑板 检验地点 25g(mL) 样品数量 固态 (或液态) 样品状态 按标签上的批号填写 样品编号 按国标右上角的编号写 检验方法依据 按试题单上填写 样品名称 备注 符合(或不符合) 单项检验结论 查看“产品标准值”表,填写 标准值 7.0 ×103CFU/g( 7.0×102CFU/mL) 实测结果 温度:36℃ ±1 ℃ 时间:48h ±2h 培养条件 0 19 70 多不可计 平均值 0 0 16 22 64 75 多不可计 多不可计 菌落数 空白值 10-3/-2 10-3/-2 10-2/-1 10-2/-1 10-1/0 10-1/0 稀释度
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