第三章新遗传物质的分子基础.ppt

PCR的类型 ㈠巢式PCR ㈦原位PCR ㈡多重PCR ㈧定量PCR ㈢不对称PCR ㈨差异显示PCR ㈣共享引物PCR ㈩重组PCR ㈤锚定PCR (十一)RT-PCR ㈥彩色PCR (十二)RAPD PCR技术的发展与应用 ?用于合成特异探针； ?用于DNA的测序； ? 将逆转录与PCR相偶联 （RT-PCR）； ?用于基因定位诱变； ?末知序列的PCR扩增； ?基因组序列的比较研究； ?用于临床诊断。 遗传密码及中心法则见教材 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * 5、染色体端体的复制 原核生物的染色体大多数为环状，而真核生染色体为线状。 端体：染色体其末端有特殊DNA序列组成的结构称为。 根据DNA合成的过程，新链5’末端DNA是无法自动合成的，因为当末端的RNA引物被切除后，就没有3’端的自由羟基为DNA的合成作引物。 在DNA的末端存在特殊的结构，并在含有RNA的端体酶(telomerase)的催化下完成末端的合成。 主要不同点： 真核生物与原核生物DNA 合成的区别 区别 原核生物 真核生物 DNA 合成的时期 整个细胞生长过程 细胞周期的S 期 复制起点数 单个 多个 RNA 引物长度 10~60 核苷酸 10 核苷酸 冈崎片段长度 1000~2000 核苷酸 100~150 核苷酸 前导链与后随链 的合成 聚合酶III 同时控制 聚合酶δ控制前导链 聚合酶α控制后随链 第五节 RNA的转录及加工 遗传物质不管其化学性质如何，其必须具有遗传、表达和变异等三种基本功能。 下面我们介绍其第二个重要的功能—基因表达。 基因的表达：第一步DNA转录(transcription)为RNA，然后由RNA再翻译(translation)成蛋白质。 转录：就是以DNA双链之一的遗传密码为模板，把遗传密码以互补的方式转录到mRNA上。??????????????? 翻译：就是mRNA携带着转录的遗传密码，附着在核糖体上，把tRNA运来的各种氨基酸，按照mRNA的密码顺序，相互连接起来成为多肽链，并进一步折叠起来成为立体蛋白质分子。 先介绍RNA的转录 一、三种RNA分子 信使RNA (messenger RNA，mRNA) 转移RNA (transfer RNA，tRNA) 核糖体RNA (ribosomal RNA，rRNA) 三种不同的RNA分子在基因的表达过程中起重要的作用。 (一)mRNA mRNA的功能就是把DNA上的遗传信息精确无误地转录下来，然后，由mRNA的碱基顺序决定蛋白质的氨基酸顺序，是基因表达过程中遗传信息传递的中介。 它起着传递信息的作用，因而称为信使RNA (mRNA)。 在真核生物中，转录形成的RNA中，含由大量非编码序列，大约只有25％RNA经加工成为mRNA，最后翻译为蛋白质。 未经加工的前体mRNA(pre-mRNA)在分子大小上差别很大，所以通常称为不均一核RNA (heterogeneous nuclear RNA，hnRNA)。 前面已经介绍，生物的遗传信息主要贮存于DNA的碱基序列中，但DNA并不直接决定蛋白质的合成。而且在真核细胞中，DNA主要存在于细胞核的染色体上，而蛋白质的合成中心却位于细胞质的核糖体上。因此，它需要一种中介物质，才能把DNA上控制蛋白质合成的遗传信息传递给核糖体。 (二)tRNA 如果说mRNA是合成蛋白质的蓝图，则核糖体是合成蛋白质的工厂。 由于合成蛋白质的原材料—20种氨基酸与mRNA的碱基之间缺乏特殊的亲和力。 因此，必须用一种特殊的RNA—转移RNA(tRNA)把氨基酸搬运到核糖体上，tRNA能根据mRNA的遗传密码依次准确地将它携带的氨基酸连结成多肽链。 每种氨基酸可与1－4种tRNA相结合，现在已知的tRNA的种类在40种以上。 tRNA是最小的RNA。其分子量约为27000(25000－30000)，由70到90个核苷酸组成。 1969年以来，研究了来自各种不同生物，如：酵母、大肠杆菌、小麦、鼠等的十几种tRNA的结构，证明它们的碱基序列都能折叠成三叶草叶型。 tRNA的结构的共性： (1) 5’端之末具有G(大部分)或C。