SOP标准操作程序-Ca.docVIP

SOP标准操作程序 钙（货号：OSR6113，OSR6213） 实验原理： 钙测量用于诊断和治疗甲状腺炎，骨病的一种，慢性肾病和手足抽搐（间歇性肌肉收缩或痉挛）。 尽管体内超过99%的钙存在于骨骼和牙齿，临床上最关心血液里的钙。骨骼作为一个储存器，保持相对稳定的血清钙，通过释放钙防止低血钙和吸收钙防止血清钙水平过高。 饮食中钙的含量增加，吸收钙的百分比就减少，因此，吸收钙的数量能够保持相对稳定。在高钙饮食中钙吸收的轻微增加被反映在增加的肾排泄中。 血清钙以三种形式存在：1）离子钙，Ca2+，50%pH值对离子钙水平的影响很大，钙的水平和磷的水平大约成反比。 钙离子在神经冲动的传输中非常重要，在一些酶反应中，维持肌肉正常的收缩性中以及凝结过程中作为一个辅助因素。钙离子浓度的明显减少会引起肌肉痉挛。钙离子浓度高于正常值会引起较低的神经肌肉的刺激反应性和肌肉衰弱以及其它更多的复杂的症状1。 在疾病中，钙的浓度可能会高于也可能会低于正常值。正常水平在儿童中最高，随后逐渐减少。血清钙的变化可能会由于以下一些疾病，副甲状腺病，骨病，肠中钙的吸收有缺陷，肾病，多发性骨髓瘤和其它各种异常。 方法: 在奥林巴斯AU640钙的测定中，钙离子（Ca2+）在碱性溶液中和邻甲酚酞络合酮（OCPC）形成紫色复合物，在577nm处有一个最大吸收峰2，3，加入8-羟基喹啉消除镁和铁的干扰4。在570/600nm读取吸光度，复合物显色强弱与血清钙浓度成正比。 8-羟基喹啉 Ca2+ + OCPC -------------﹥Ca-OCPC复合物（紫色） PH 10 标本： 病人准备：无特殊要求。 类型：尽快从细胞中分离出的血清或无溶血的肝素化的血浆。在收集血液过程中不要使用下列抗凝剂：EDTA，柠檬酸钠，氟化钠或草酸盐。留取24小时尿样。 标本稳定性：血清钙在室温下至少稳定24小时，泠藏情况下大约一周，冰冻条件下大约一年。 在收集24小时标本前，应在保存尿钙的容器中加入10mL的6M HCL。在收集期间，尿应当被很好地混合保存8。 仪器与材料: 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪 材料：奥林巴斯AU640钙 参与反应成份的最终浓度： 缓冲液（PH11.1） 0.1 mmol/L 邻甲酚酞络合酮 64.6 μmol/L 8-羟基喹啉 7.0 mmol/L 盐酸 46.5 mmol/L 其中含有保护剂。 注意：1. 此试剂为体外诊断用。 2. 警告！腐蚀性！避免吞服或与眼睛或皮肤接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。 3. 保护剂为叠氮钠，与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 试验用试管的直径在12～16mm。 定标液：奥林巴斯定标液（Cat. No. DR0040）。 试剂准备：奥林巴斯AU640的钙试剂是即开即用的。无需特殊准备。 执行参数（性能参数）：以下数据是根据奥林巴斯AU640钙试剂已经建立的程序。 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的典型方法7，AU640批内精密度小于3%，总精密度小于5%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。 常规： N=100 批 内 精 密 度 总 精 密 度 平均值（mg/dL） SD CV% SD CV% 6.9 0.04 0.5 0.07 1.0 11.3 0.06 0.5 0.11 1.0 13.9 0.05 0.4 0.12 0.8 尿： N=100 批 内 精 密 度 总 精 密 度 平均值（mg/dL） SD CV% SD CV% 8.7 0.06 0.7 0.15 1.7 14.4 0.08 0.6 0.22 1.5 方法学比较： 血清：奥林巴斯AU640 钙（方法1）与其它奥林巴斯分析仪器（方法2），共同做180个病人标本。相关系数达到0.999，回归方程如下： 钙方法1=（钙方法2×0.999）-0.01 病人结果数值分布： 0.8～16.7 mg/dL 尿：奥林巴斯AU640 尿钙（方法1）与与其它相似的方法（方法2），共同做181个病人标本。相关系数达到0.9998，回归方程如下： 钙方法1=（钙方法2×0.999）+0.01 病人结果数值分布： 0.3～21.0 mg/dL 敏感度：在奥林巴斯AU640生化分析仪上每分钟变化37毫吸光度为1 mg/dL。 试剂的贮存：1.当保存于2～25℃，不开盖情况下至标签的失效期。