贝类生物学作业详解.ppt

Variation in the antiviral and antibacterial activity of abalone Haliotis laevigata, H.rubra and their hybrid in South Australia澳大利亚南部绿唇鲍、黑唇鲍和它们的杂种鲍之间抗菌和抗病能力的差异性研究 秦英惠 水产动物病害与免疫学研究室 1、研究背景 1.1、鲍鱼是世界性的海珍品，是世界上重要的海水养殖贝类。四大海珍品之首，有“软黄金”之称。而绿唇鲍和黑唇鲍是澳大利亚最为重要的两种鲍鱼养殖种类。 1.2、近些年时常爆发的疾病给养鲍业带来巨大的经济损失，例如：由疱疹病毒引起的鲍鱼神经性疾病死亡率高达95%，由弧菌、高温等引起的鲍鱼夏季大规模死亡，死亡率达80%以上。 1.3、病毒病或夏季大规模死亡中有5–40%的鲍鱼可以度过危机存活下来。本实验希望通过比较种间、种内鲍鱼抗病能力的差异，筛选出抗病能力较强的种类，为培育抗病能力较强的鲍鱼品种提供材料。 2.1 实验流程图 2.2、空斑减少试验(Plaque Reduction Assay) 2.3、抗菌实验：MTT比色法 3、结果 3.1、野生鲍鱼血淋巴的抗病毒能力显著高于人工养殖鲍鱼血淋巴的抗病毒能力(P=0.001)。不同种间(P=0.14)和不同地理位置间(p=0.3)没有显著性差异。 3.2、野生鲍鱼血淋巴的抗菌活性显著高于人工养殖鲍鱼血淋巴的抗菌活性(P=0.001).绿唇鲍血淋巴的抗菌活性与黑唇鲍血淋巴的抗菌活性没有显著性差异(P=0.75), 但显著性低于杂交种鲍鱼(P=0.001). 3.3、鲍鱼血淋巴的抗菌和抗病毒活性随着鲍鱼壳长缓慢增加，人工养殖2龄鲍鱼血淋巴的抗病活性低于3龄鲍鱼血淋巴活性。 3.4、繁殖活动对鲍鱼血淋巴的抗菌和抗病毒活性没有显著性影响(P=0.96) 。 4、疑惑 4.1、鲍鱼血淋巴的抗菌（病毒）活性的差异是否可以遗传？应在子代中，取血淋巴进一步求证。 4.2、血淋巴体外实验活性的高低能否代表鲍鱼抗病能力的高低？ 可采取攻毒试验后检测鲍鱼体内ACP、ALP、HtH、HSP、SOD、PO、CAT等免疫相关基因表达量的变化并统计攻毒后的免疫保护率以探究血淋巴抗菌活性与鲍鱼抗病能力之间的关系。 4.4、有实验表明鲍鱼幼苗比成年鲍鱼更易感染疱疹病毒病，且在临床表现正常的成年鲍鱼体内发现疱疹病毒。一方面可能是幼鲍免疫系统发育不完善，另一方面也可能与成年鲍生活史中接触过疱疹病毒导致免疫增强有关。故笔者建议实验前应首先了解所用鲍鱼生活史中是否有疾病爆发或直接取血淋巴鉴定鲍鱼体内是否有疱疹病毒和弧菌等特定病原体，以确保所用鲍鱼为specific pathogen free(SPF) animal，减少试验误差。 * 模板来自于 / * 模板来自于 * 研究背景 01 实验流程 02 结果 03 疑惑 04 目 录 收集鲍鱼 取血淋巴 空斑减少试验 体外抗弧菌实验 FL-2 催产组 8 males 8 females 对照组 5 males 5 females maximum shell length 实验组 haemolymph (6%, v/v) 对照组 no haemolyph treatment groups 90 μl 血淋巴和10 μl 鳗弧菌液 negative controls 90 μl 血淋巴和10μl 液体培养基 positive controls 10 μl 鳗弧菌液和90 μl 液体培养基 4.3、鲍鱼血淋巴的抗菌和抗病毒活性随着鲍鱼壳长缓慢增加。 * 模板来自于 / * 模板来自于 * * *